犬白介素-21基因的擴(kuò)增、克隆與序列分析.pdf

1、本研究通過對(duì)分離到的犬白細(xì)胞的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增，而后將純化回收的PCR產(chǎn)物與T載體連接，篩選到陽性克隆后，經(jīng)序列測(cè)定，得到了犬白細(xì)胞介素21的基因編碼序列。再用DNAstar分析軟件，與已發(fā)表的人和家鼠的白細(xì)胞介素21的基因編碼序列，進(jìn)行核苷酸和氨基酸序列的比較分析，結(jié)果表明，犬IL-21與人IL-21的核苷酸和氨基酸同源性最高(88.9﹪)，而犬與家鼠的IL-21的核苷酸和氨基酸的同源性相對(duì)要低(77.1﹪)。說明犬與人的白

2、細(xì)胞介素21的親緣關(guān)系較近，而犬與家鼠的親緣關(guān)系相對(duì)要遠(yuǎn)一些。 由于犬白介素21對(duì)于動(dòng)物機(jī)體具有非特異性的免疫增強(qiáng)活性，因而，它可以和許多種類的核酸疫苗進(jìn)行聯(lián)合使用。現(xiàn)階段核酸疫苗的免疫效果總是差強(qiáng)人意，因此，將二者結(jié)合將會(huì)有很廣闊的應(yīng)用前景。本試驗(yàn)得到了犬的白細(xì)胞介素21的編碼基因，這為下一步將其與pVAX1等真核表達(dá)載體進(jìn)行連接，構(gòu)建重組表達(dá)載體，并為更深層次研究IL-21的生物學(xué)作用及對(duì)IL-21的應(yīng)用研究，如增強(qiáng)基因工程