犬細(xì)小病毒流行株的分離鑒定與VP2基因序列分析.pdf

1、犬細(xì)小病毒(Canineparvovirus，CPV)是細(xì)小病毒科，細(xì)小病毒屬成員。CPV感染的犬出現(xiàn)出血性腸炎、非化膿性心肌炎，劇烈嘔吐、腹瀉、白細(xì)胞減少等癥狀。CPV傳播速度極快，主要通過(guò)消化道感染，各年齡、品種的犬都易感，發(fā)病率和死亡率均較高。CPV對(duì)理化因素的抵抗能力強(qiáng)，可以在自然條件下存活較長(zhǎng)時(shí)間，在世界范圍內(nèi)的犬群中廣泛傳播，是危害養(yǎng)犬業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一，可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
　　 本研究對(duì)2010年10月～2

2、012年3月山東青島地區(qū)寵物醫(yī)院就診的病犬抽樣并進(jìn)行了CPV的流行病學(xué)調(diào)查，CPV的分離鑒定，一株CPV的VP2基因測(cè)序及分析等試驗(yàn)研究。隨機(jī)抽取2010年10月～2012年3月收集的17份疑似犬細(xì)小病毒樣本，應(yīng)用PCR方法進(jìn)行檢測(cè)，其中有5份樣本為CPV陽(yáng)性。應(yīng)用F81細(xì)胞從5份CPV陽(yáng)性樣品中分離出2株病毒，分別命名為QN1，QN2。經(jīng)電鏡觀察、PCR檢測(cè)及序列測(cè)定等方法證明所分離的病毒為犬細(xì)小病毒，并通過(guò)動(dòng)物回歸試驗(yàn)表明分離株可以

3、引起試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)典型的CPV癥狀，這表明CPV在山東青島地區(qū)犬群中仍廣泛存在。
　　 本研究通過(guò)PCR方法擴(kuò)增了QN1的VP2全基因片段，測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)QN1與參考毒株的同源性均在98％以上，沒有形成明顯的分支;通過(guò)遺傳進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)，QN1與FPLV參考株的遺傳距離較近，與CPV參考毒株的遺傳距離相對(duì)較遠(yuǎn)。該研究從分子水平上對(duì)山東青島地區(qū)的犬細(xì)小病毒進(jìn)行了遺傳進(jìn)化的分析，有助于進(jìn)一步研究山東地區(qū)的犬細(xì)小病毒的變異性，為犬細(xì)小病毒的預(yù)