經(jīng)靜脈移植脂肪干細(xì)胞在兔激素性股骨頭壞死模型體內(nèi)的示蹤研究.pdf

1、目的：體外分離培養(yǎng)兔脂肪干細(xì)胞并觀察其生物學(xué)特性；探討少劑量激素聯(lián)合馬血清建立兔激素性股骨頭壞死動物模型的可行性研究；通過觀察靜脈移植脂肪干細(xì)胞能否在壞死股骨頭動物模型體內(nèi)存活、增值，以探討脂肪干細(xì)胞在激素性股骨頭壞死模型體內(nèi)的示蹤研究。 方法：①．采用密度梯度離心法加貼壁培養(yǎng)法對兔脂肪組織進(jìn)行了分離純化，CD44免疫組化法分析ADSCs表面標(biāo)志；用含成骨、成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)4周后，行堿性磷酸酶染色、Von kossa染色及油紅

2、“0”染色檢查ADSCs是否向成骨、成脂細(xì)胞定向分化。②，長期少劑量肌注激素聯(lián)合馬血清建立兔激素性股骨頭缺血壞死動物模型，分別于2周、4周、8周行X線影像學(xué)、HE染色病理學(xué)及電鏡觀察股骨頭缺血壞死情況。③．將帶有BrdU標(biāo)記的ADSCs通過靜脈移植于股骨頭缺血壞死動物模型，移植后4周、8周行BrdU免疫組化檢查，觀察脂肪干細(xì)胞是否在模型體內(nèi)存活、增值。 結(jié)果：①．ADSCs體外分離培養(yǎng)增殖迅速，短時間內(nèi)可擴(kuò)增到組織工程需要的種子

3、細(xì)胞數(shù)量；免疫組化檢測ADSCs表面抗原CD44陽性，且細(xì)胞保持未分化狀態(tài)；特殊誘導(dǎo)條件下可向成骨、成脂定向分化。②．通過X線、HE病理學(xué)和電鏡觀察證明成功建立激素性股骨頭缺血壞死動物模型；③．BrdU體外細(xì)胞標(biāo)記率達(dá)90%，且標(biāo)記前后細(xì)胞活性無統(tǒng)計學(xué)差異；標(biāo)記前后生長趨勢亦無明顯差異；移植后各時間點模型體內(nèi)的髓腔、肝臟等組織內(nèi)均可見到經(jīng)BrdU標(biāo)記的陽性細(xì)胞存在。 結(jié)論：①．ADSCs可以作為組織工程的理想種子細(xì)胞；②．馬血清