樹突狀細胞DC-SIGN在腎炎腎小管間質(zhì)損傷中作用研究.pdf

1、腎臟疾病多系免疫介導(dǎo)或引發(fā)的免疫炎癥性疾病。此外，無論原發(fā)性或繼發(fā)性腎小球疾病，均可伴有不同程度的腎小管間質(zhì)損害，且腎小管間質(zhì)病變是直接影響腎臟疾病進展及患者預(yù)后的關(guān)鍵因素。 近年研究發(fā)現(xiàn)，樹突狀細胞(DC) 在腎臟疾病中發(fā)揮關(guān)鍵作用，腎炎時腎內(nèi)DC數(shù)量增多，主要聚集于腎小管間質(zhì)區(qū)域，與腎小管間質(zhì)損傷關(guān)系密切。以往研究也發(fā)現(xiàn)，DC 參與腎臟浸潤和炎癥啟動，與黏附分子P-選擇素起始介導(dǎo)遷移有關(guān)，并與腎小管間質(zhì)早期損傷乃至腎纖維化形

2、成密切相關(guān)。利用研制的針對P-選擇素lectin-EGF功能域單抗(PsL-EGFmAb)，對DC 遷移浸潤具有抑制作用，且該單抗還可通過抑制DC 表面與選擇素同屬C型凝集素的DC-SIGN 表達，調(diào)抑DC刺激T細胞的功能。DC-SIGN(亦稱CD209) 是DC特異性免疫調(diào)節(jié)分子，可介導(dǎo)DC 炎癥組織遷移以及與白細胞相互作用等，調(diào)節(jié)炎癥病理生理過程中的天然免疫和適應(yīng)性免疫。 腎毒性血清性腎炎(NTN) 是一種由免疫介導(dǎo)的人類新

3、月體腎炎的模型。一般認為，該腎炎發(fā)病依賴于CD4+Th1細胞和巨噬細胞。近年研究發(fā)現(xiàn)，DC在NTN中發(fā)揮了重要作用。NTN發(fā)生時，腎內(nèi)DC 可刺激抗原特異性CD4+T細胞，既分泌具有改善NTN 作用的抗炎因子IL-10，同時也分泌Th1 型促炎因子INF-γ，而清除腎內(nèi)DC 則對腎組織損傷尤其是腎小管間質(zhì)損傷具有重要影響，表明DC 在NTN 發(fā)病中起著關(guān)鍵作用。但目前為止，對NTN 腎內(nèi)DC 包括浸潤方式及其作用機制還不甚清楚。

4、為此，本實驗首先觀察了不同病理類型腎炎患者腎組織內(nèi)DC-SIGN表達及DC-SIGN+DC 分布，探討與腎炎腎小管間質(zhì)損傷和病變的關(guān)系。 然后在制備大鼠NTN模型基礎(chǔ)上，結(jié)合PsL-EGFmAb等抗黏附干預(yù)手段，觀察了腎炎大鼠腎組織DC-SIGN+DC浸潤變化。繼而，觀察分析經(jīng)干預(yù)DC-SIGN+DC浸潤后的大鼠腎內(nèi)DC相關(guān)炎癥因子、趨化因子以及Th1/Th2平衡等變化。在此基礎(chǔ)上，進一步探討了DC-SIGN+DC 在NTN發(fā)病

5、中可能的作用機制。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，伴隨著DC-SIGN 在腎炎患者腎組織以腎小管間質(zhì)為主廣泛高表達，與腎小管間質(zhì)病變程度明顯相關(guān)。DC-SIGN+DC以腎小管間質(zhì)為主分布明顯增多，且與患者腎小管間質(zhì)損傷程度及腎功能改變密切相關(guān)。此外，DC-SIGN+DC 在腎小管間質(zhì)分布數(shù)量與DC-SIGN 表達明顯相關(guān)。利用NTN 大鼠模型進一步發(fā)現(xiàn)，DC-SIGN+DC 主要集中于腎小管間質(zhì)區(qū)域，少部分分布在腎小球旁，且隨著病變加重明顯增多，與

6、腎組織病理損傷和腎功能改變顯著相關(guān)。繼而發(fā)現(xiàn)，經(jīng)PsL-EGFmAb等干預(yù)后，伴隨著DC-SIGN+DC 浸潤減少，腎內(nèi)IL-10 mRNA 表達上調(diào)，TNF-α mRNA和RANTES mRNA 表達下降，Th1/ Th2 值也相應(yīng)下調(diào)，大鼠腎組織損傷和腎功能得以減輕與改善。 由上述實驗結(jié)果并結(jié)合我們以往工作表明，DC的NTN腎內(nèi)浸潤不僅與P-選擇素介導(dǎo)有關(guān)，也與DC-SIGN的黏附途徑相關(guān)。在上述過程中，選擇素介導(dǎo)了DC 黏

7、附遷移及腎內(nèi)浸潤；而依據(jù)DC-SIGN 功能，其更可能在參與DC 遷移中，介導(dǎo)DC 啟動免疫應(yīng)答，以及在DC 調(diào)節(jié)大鼠腎臟炎癥尤其腎小管間質(zhì)損傷中發(fā)揮重要作用。此外，DC-SIGN 及其介導(dǎo)DC的上述作用，也受腎內(nèi)局部微環(huán)境病生理狀況的影響，可調(diào)控DC誘導(dǎo)的局部免疫應(yīng)答，以及Th1/ Th2反應(yīng)的平衡，直至影響腎炎腎小管間質(zhì)損傷修復(fù)或病變進展。 在此基礎(chǔ)上進一步表明，PsL-EGFmAb可通過抑制DC-SIGN，而對NTN中DC