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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察脂聯(lián)素對(duì)高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細(xì)胞活性、caspase-3與T-鈣粘蛋白(T-cad)表達(dá)的影響,以探討脂聯(lián)素對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)的作用。
方法:①將人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞隨機(jī)分為正常對(duì)照組(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖組(33mmol/L葡萄糖)、脂聯(lián)素組(33mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml脂聯(lián)素),運(yùn)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定不同情況下48小時(shí)后對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞活性的
2、影響。②再將上述各組細(xì)胞分別培養(yǎng)24小時(shí),48小時(shí),72小時(shí)后,運(yùn)用熒光定量PCR法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)T-鈣粘蛋白的表達(dá)水平,運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定細(xì)胞上清液中caspase-3的含量。
結(jié)果:①高糖組的細(xì)胞活力明顯低于正常對(duì)照組(P<0.05),而在脂聯(lián)素干預(yù)后,細(xì)胞活力比高糖組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②正常對(duì)照組未見(jiàn)caspase-3的明顯表達(dá);24h、48h及72h高糖組的caspase-3
3、較正常對(duì)照組表達(dá)增加(P<0.01);而24h、48h及72h脂聯(lián)素組的caspase-3較高糖組表達(dá)下降(P<0.01)。③24h、48h及72h高糖組較正常對(duì)照組的T-鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào),而脂聯(lián)素組較高糖組的T-鈣粘蛋白表達(dá)上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:高糖對(duì)hRPE細(xì)胞具有毒性作用,它可明顯降低hRPE細(xì)胞的活力,上調(diào)caspase-3的表達(dá),從而損傷hRPE細(xì)胞的功能,并誘導(dǎo)其凋亡;另外,高糖還可通過(guò)下調(diào)T-鈣粘蛋
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