色素上皮衍生因子對體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜色素上皮細胞生長周期的影響.pdf

1、目的:探討色素上皮衍生因子(PEDF)對體外培養(yǎng)的人類視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細胞生長周期的影響及其可能作用機制，為PEDE臨床應用提供實驗依據(jù)。 方法:采用MTT法檢測不同濃度的PEDF和不同作用時間下體外培養(yǎng)的hRPE細胞的吸光度(A值)，繪制生長曲線；采用流式細胞術(shù)檢測PEDF對hRPE細胞生長周期變化及細胞周期蛋白Cyclin D1表達的影響，用免疫組化方法檢測PEDF對hRPE細胞P16表達的影響。 結(jié)果:

2、 1、在不同濃度PEDF作用下，hRPE細胞吸光度(A值)隨濃度增加而增加，且與對照組比較差別均有統(tǒng)計學意義，不同濃度組間的差別也均有統(tǒng)計學意義；而50ng/ml PEDF作用下，加藥后第二天開始PEDF組A值均高于對照組，48h的促增殖作用最明顯。 2、PEDF組與對照組比較，細胞周期GO/G1、S、G2/M各期所占比例均發(fā)生明顯的波動，自12h起，PEDF組GO/G1期逐漸比例減小，S期比例逐漸增大并在48h達高峰，G

3、2/M期比例無明顯變化，60h后G2/M期比例上升，S期比例回降。在12h～60h間，G0/G1期細胞數(shù)明顯低于對照組，S期細胞數(shù)明顯高于對照組，而G2/M期沒有明顯變化。 3、體外培養(yǎng)的hRPE細胞基礎(chǔ)性表達Cyclin D1和P16，PEDF組Cvclin Dl表達明顯高于對照組，Pl6表達較對照組有升高，但二者差別無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論:PEDF可促進體外培養(yǎng)的hRPE細胞的生長活力，呈一定的劑量一效應和時間一效應關(guān)