體外傳代培養(yǎng)對人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響.pdf

1、目的：研究體外傳代培養(yǎng)對HRPE細(xì)胞的吞噬功能、誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡和細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響。 方法： 倒置相差顯微鏡觀察體外培養(yǎng)HRPE細(xì)胞形態(tài)變化；采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測其角蛋白-18及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達(dá)變化；應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)測定不同傳代數(shù)HRPE細(xì)胞Fas的表達(dá)和誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡的差異；應(yīng)用酶標(biāo)儀技術(shù)測定不同傳代數(shù)HRPE細(xì)胞吞噬色素顆粒的差異。 結(jié)果： HRPE細(xì)胞體外培養(yǎng)時形

2、態(tài)由上皮細(xì)胞特征變化成為間質(zhì)樣細(xì)胞；細(xì)胞角蛋白-18表達(dá)與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.831，P<0.001)，α-SMA表達(dá)與傳代代數(shù)呈正相關(guān)(r=0.456，P=0.002)；HRPE與淋巴細(xì)胞體外共培養(yǎng)時，HRPE細(xì)胞Fas表達(dá)隨著傳代逐漸減弱，F(xiàn)as表達(dá)與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(陽性細(xì)胞率，r=-0.859，P<0.001；平均熒光強(qiáng)度r=-0.880，P<0.001)，HRPE細(xì)胞誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡隨著傳代逐漸減弱，淋巴細(xì)胞凋亡率與傳

3、代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.838，P<0.001)，共培養(yǎng)時傳代HRPE細(xì)胞Fas表達(dá)迅速下降，至第3代與第4代間Fas表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，共培養(yǎng)時傳代HRPE細(xì)胞誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡率迅速下降，至第3代與第4代間淋巴細(xì)胞凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HRPE細(xì)胞體外培養(yǎng)時吞噬色素功能逐漸減弱，HRPE細(xì)胞吸光度與傳代代數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.892，P<0.001)；HRPE細(xì)胞傳代時吞噬色素能力從第3代開始迅速