氯離子通道3在小鼠血管平滑肌細胞增殖和激活基質金屬蛋白酶9中的作用.pdf

1、研究目的：研究腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對小鼠血管平滑肌細胞(VSMCs)增殖的誘導作用及對基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)的影響，并探討氯離子通道3(ClC-3)在TNF-α誘導的VSMCs增殖及遷移中的重要作用。 研究方法：體外培養(yǎng)ClC-3野生型(wildtype，WT)和基因敲除型(ClC-3 KO)小鼠主動脈血管平滑肌細胞。野生型VSMCs分為：正常對照組、TNF-α組、NFA(尼氟滅酸)組、NFA+TNF-α組、

2、腺病毒基因(Ad-ClC3)轉染組、腺病毒基因(Ad-ClC3)轉染+TNF-α組、腺病毒基因轉染對照組(Ad-GFP)、腺病毒載體(Ad-GFP)基因轉染+TNF-α組.ClC-3基因敲除型VSMCs分為：正常對照組、TNF-α組、腺病毒基因(Ad-ClC3)轉染組、腺病毒載體(Ad-ClC3)基因轉染+TNF-α組、腺病毒載體基因轉染對照組(Ad-GFP)、腺病毒載體(Ad-GFP)基因轉染+TNF-α組。以熒光顯微鏡觀察野生型及C

3、lC-3基因敲除型各組VSMCs在不同MOI時腺病毒載體基因轉染的效率，用3H-胸腺嘧啶脫氧核苷(3H-TDR)摻入法測定野生型及ClC-3基因敲除型各組VSMCs的DNA合成和細胞增殖程度；以明膠酶譜法(Zymography)對比野生型及ClC-3基因敲除型各組VSMCs的MMP-9的表達情況。 研究結論： (1)TNF-α可誘導小鼠VSMCs的增殖，并激活與細胞遷移有關的基質金屬蛋白酶-9，從而促進動脈粥樣硬化(AS