基因芯片篩選胃癌5-FU耐藥基因標(biāo)志譜及其耐藥細(xì)胞株的建立.pdf

1、內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文基因芯片篩選胃癌5-FU耐藥基因標(biāo)志譜及其耐藥細(xì)胞株的建立姓名：齊力申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：孟興凱;侯明星20080501內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文( 2 0 0 8 年)中 文 摘 要目的利用化療藥物對(duì)胃癌細(xì)胞株B G c 一8 2 3 反復(fù)篩選、誘導(dǎo)，建立具有耐藥性的胃癌細(xì)胞株，并與親代細(xì)胞株B ( Z 一8 2 3 對(duì)比生長(zhǎng)特性及基因譜表達(dá)改變。初步探討胃癌的耐藥機(jī)制，為胃癌臨床化療方法

2、改進(jìn)提供理論依據(jù)。方法 1 、體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞株B G C 一8 2 3 。利用M ，r T 法進(jìn)行舌癌細(xì)胞株的梯度急性毒性試驗(yàn)，了解各種化療藥物不同濃度對(duì)胃癌細(xì)胞株B G C 一8 2 3 的殺傷效應(yīng)，估計(jì)化療藥物的長(zhǎng)期效應(yīng)，為耐藥細(xì)胞株的誘導(dǎo)、篩選尋找合適的初始劑量和藥物濃度提升梯度。2 、利用5 一氟脲嘧啶( 5 一n l l 砌卜r a c i l ，5 一F u ) 大劑量濃度逐漸遞增間歇給藥的方法殺死絕大部分敏感的B G C

3、 一8 2 3 細(xì)胞后，撤除化療藥物，讓剩余的細(xì)胞在無(wú)藥培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，使其逐漸恢復(fù)生長(zhǎng)達(dá)到可以常規(guī)傳代的水平。再次加入化療藥物，重復(fù)以上過(guò)程，通過(guò)反復(fù)誘導(dǎo)、篩選，得到胃癌耐藥細(xì)胞株，分別命名為B G C 一8 2 3 ／F u o 3 、對(duì)比親代細(xì)胞株T c a 8 1 1 3 及其耐藥細(xì)胞株T c a 8 1 1 3 ／C a 和T c 勰1 1 3 ／F u 之間的形態(tài)改變o4 、分別抽提親代細(xì)胞株和兩個(gè)耐藥細(xì)胞株( T c a

4、 8 1 1 3 ，T c a 8 1 1 3 ／C a 和T c a 8 1 1 3 ／F u ) 的總礎(chǔ)蛆，進(jìn)行基因芯片分析對(duì)比它們基因表達(dá)譜的改變。結(jié)果1 、通過(guò)間歇加藥的方法建立了胃癌細(xì)胞株5 一氟脲嘧啶耐藥細(xì)胞株，命名為B G C 一8 2 3 ／F u ；2 、用耐藥細(xì)胞株B G C 一8 2 3 ／F u 的基因表達(dá)譜對(duì)比親代細(xì)胞株B G C 一8 2 3 基因表達(dá)譜，有9 7 條基因表達(dá)出現(xiàn)差異，其中6 4 條基因發(fā)生上