基因Ⅵ型中不同亞型新城疫病毒的生物學(xué)特性測定及遺傳進(jìn)化分析.pdf

1、新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)又稱禽副粘病毒1型(Avianparamyxovirus-1，APMV-1)，是副粘病毒科、禽腮腺炎病毒屬中的一員。根據(jù)毒力的不同，NDV可被分為高致病性、中等毒力和低致病性毒株。盡管NDV只有一個(gè)血清型，但卻存在多個(gè)基因型。基因Ⅵ型可被進(jìn)一步分為9個(gè)亞型(Ⅵa～Ⅵi)，其中，Ⅵb亞型毒株為鴿源分離株，對(duì)鴿具有宿主特異性;而Ⅵa和Ⅵc～Ⅵi亞型主要為雞源毒株。本研究對(duì)臨

2、床分離到的6株基因Ⅵ型NDV的生物學(xué)特性進(jìn)行了測定，并從中選取4株不同亞型的NDV進(jìn)行SPF雞的致病性試驗(yàn)。結(jié)果表明:雞源毒株對(duì)雞呈現(xiàn)出高致病性;鴿源毒株雖為中強(qiáng)毒，但對(duì)雞僅表現(xiàn)為低致病性。此外，我們選取40株宿主來源明確的基因Ⅵ型NDV進(jìn)行了遺傳進(jìn)化和全基因組序列的比對(duì)分析，進(jìn)一步比較了鴿源和雞源基因Ⅵ型毒株在分子水平上的差異，為防控基因Ⅵ型NDV提供理論支持。
　　1、基因Ⅵ型不同亞型新城疫病毒生物學(xué)特性測定
　　6株基

3、因Ⅵ型NDV生物學(xué)特性測定結(jié)果顯示:5株雞源毒株的MDT均小于60h，ICPI均大于1.7，與其它雞源毒株相比，Kuwait株的毒力相對(duì)較低;鴿源毒株JS/07/04/Pi的MDT、ICPI和IVPI分別為88h、1.2和0.89，屬于中等毒力毒株。選取Kuwait（Ⅵa亞型）、JX-1/94（Ⅵf亞型）、ZhJ3（Ⅵg亞型）和JS/07/04/Pi（Ⅵb亞型）進(jìn)行30日齡SPF雞的攻毒試驗(yàn)。Kuwait、JX-1/94和ZhJ3感染組

4、雞表現(xiàn)出典型的新城疫癥狀，病程急促，發(fā)病率和死亡率為100％;各組織臟器的組織損傷及病理變化明顯，以脾臟、胸腺和法氏囊壞死為特征;喉頭和泄殖腔病毒檢出率高，感染后第5天可達(dá)100％。但與ZhJ3和JX-1/94相比，Kuwait株感染組雞的病程較長。鴿源毒株JS/07/04/Pi感染雞后幾乎不引起任何臨床癥狀及組織損傷。本研究表明，基因Ⅵ型NDV中，除鴿源Ⅵb亞型毒株外，其它亞型毒株對(duì)雞均表現(xiàn)為高致病性，但與其它雞源毒株相比，早期的Ⅵa

5、亞型毒株對(duì)雞的致病性偏弱。
　　2、基因Ⅵ型新城疫病毒的遺傳進(jìn)化分析
　　根據(jù)F基因47～420位核苷酸序列對(duì)30株已知宿主來源和分離時(shí)間的基因Ⅵ型NDV進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果表明，1980s及之前基因Ⅵ型分離株的遺傳關(guān)系較近，它們之間間的核苷酸與氨基酸序列的同源性分別為92.5～100％和92.7～100％。同時(shí)，鴿源和雞源Ⅵ型毒株均與60年代Ⅵa亞型分離株的遺傳距離較近;氨基酸序列同源性分別為95.2～98.4％和96.

6、0～96.8％，表明80年代分離到的Ⅵ型毒株均由該亞型進(jìn)化而來;而上世紀(jì)80年代之后分離的病毒與Ⅵa亞型之間的遺傳距離越來越遠(yuǎn)。因此，1980s分離到的基因Ⅵ型NDV均由Ⅵa亞型進(jìn)化而來，隨著時(shí)間的推移病毒在進(jìn)化過程中出現(xiàn)了多個(gè)基因亞型。對(duì)40株基因Ⅵ型NDV的全基因序列進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析結(jié)果與上述基本一致。根據(jù)全基因序列與各基因編碼區(qū)序列分別繪制的遺傳進(jìn)化樹保持一致，說明基因Ⅵ型NDV的遺傳進(jìn)化是在基因組水平上整體進(jìn)行的。此外，為了進(jìn)一