PI3K p55PIK調(diào)節(jié)亞單位N末端在腫瘤生長及侵襲轉(zhuǎn)移中作用的研究.pdf

1、淪文題目V 7 6 1 9 7 ．；P 1 3 K p 5 5 P I K 調(diào)節(jié)亞單位N 末端在腫瘤生長及侵襲轉(zhuǎn)移中作用的研究F u n c t i o n a lS t u d i e s o n t h eN ．t e r m i n a lo f t h ep 5 5 P I K R e g u l a t o r yS u b u n i t o f P h o s p h o i n o s i t i d e3 一K i n

2、 a s e i nT u m o r G r o w t h a n d M e t a s t a s i s研究生：孫曉杰導(dǎo) 師：黃常志研究員專 業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向：信號傳導(dǎo)與腫瘤所在院所：腫瘤研究所入學(xué)時(shí)間：2 0 0 2 年9 月二o o 五年四月锪腳意Ⅲ協(xié)和醫(yī)科人學(xué)，扣嗣醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩十研究牛學(xué)位論文F u n c t i o n a l S t u d i e s o nt h e N - t e r m i

3、n a lo f t h ep 5 5 P I KR e g u l a t o r y S u b u n i t o f P h o s p h o i n o s i t i d e 3 - K i n a s e i nT u m o rG r o w t h a n d M e t a s t a s i sA b s t r a c tP h o s p h o i n o s i t i d e 3 - K i n a s

4、 e ，w h i c hi s c o m p o s e d o fa 1 10 k Dc a t a l y t i c s u b u n i ta n dar e g u l a t o r ys u b u n i t ，p l a y si m p o r t a n tr o l ei nv a r i o u sc e l l u l a rs i g n a l i n gm e c h a n i s m s ．A

5、 c t i v a t i o no f P I 3 - k i n a s eh a sb e e ni m p l i c a t e di nt h er e g u l a t i o no f v a r i o u s c e l l u l a ra c t i v i t i e s ．i n c l u d i n gp r o l i f e r a t i o n ，d i f f e r e n t i a t

6、 i o n ，m i g r a t i o n ，a p o p t o s i sa n di n s u l i n —s t i m u l a t e dg l u c o s et r a n s p o r t ．T h ed e r e g u l a t i o no fP I 3 - k i n a s ea c t i v i t y h a sb e e nl i n k e dt o av a r i e t

7、 yo fh u m a n t u m o r s ．I nr e c e n t y e a r s ，i t i sw i d e l y r e p o r t e dt h a t P 1 3 K —A k tp a t h w a yh a s b e e ni n v o l v e di nt h ei n c i d e n t so f t u m o ri n v a s i o na n d m e t a s

8、t a s i s ，s u c ha st m n o rc e l l m i g r a t i o na n da d h e s i o n ，a n g i o g e n e s i sa n d e x t r a c e l l u l a r m a t r i xd e g r a d a t i o n ．B u t i t sm o l e c u l a r m e c h a n i s m s a r e

9、 p o o r l yu n d e r s t o o d ．P 5 5 P I K i s o n e o f t h e r e g u l a t o r y s u b u n i t s o f P 1 3 - K i n a s e ．T h e 2 4 一a m i n o —a c i dN —t e r m i n a l e n d o fp 5 5 P I K ，w h i c hi s u n i q u e

10、 a m o n gP 1 3 - k i n a s e r e g u l a t o r y s u b u n i t s ，w a ss u f f i c i e n tt Ob i n dR b ，t h ek e y r e g u l a t o ro f c e l l c y c l ep r o g r e s s i o n ．T h ei n t e r a c t i o n b e t w e e n R

11、 ba n d p 5 5 P I Kp l a y s a ni m p o r t a n tr o l ei nc e l lc y c l er e g u l a t i o n ．B u tt h ee f f e c t so f t h eN —t e r m i n a l2 4 a m i n oa c i d so fp 5 5 P I Ko n g r o w t h f a c t o r s i g n a

12、l p a t h w a ya n dP 1 3 一k i n a s e f u n c t i o n a r eu n c l e a r ．S e v e r a lt u m o r c e l l l i n e sw e r e t r a n s f e c t e d w i t hp E G F P C I a n d p E G F P N 2 4 p l a s m i db yl i p o f e c t

13、i nm e t h o d ．W eo b s e r v e de c t o p i ce x p r e s s i o no f t h eN ·t e r m i n a l2 4a m i n oa c i d so f t h ep 5 5 P I K i n f l u e n c eo n c e l lc y c l e ，a n df o u n d i td e c r e a s e de x p

14、r e s s i o no f c e l lc y c l ep r o t e i n c y c l i nD 1 ．I tn o t o n l yi n h i b i t e d t u m o rc e l l p r o l i f e r a t i o na n dc o l o n y f o r m a t i o ni n v i t r o ，b u t a l s or e d u c e dt u m

15、o r o g e n i c i t yo f t u m o r c e l l si nn u d e m i c e ．W ea l s of o u n d t h a tp 5 5 P I K i n v o l v e di nc e l l m i g r a t i o ni n d u c e db yg r o w t hf a c t o rb yu s i n gw o u n d h e a l i n ga

16、 s s a ya n dc e l l m i g r a t i o na s s a y ．E c t o p i ce x p r e s s i o n o ft h eN —t e r m i n a l2 4a m i n oa c i d s o ft h ep 5 5 P I Ki n h i b i t e dc e l lm i g r a t i o na n d a d h e s i o n ．I ti n

17、c r e a s e dt h ee x p r e s s i o no f c e l la d h e s i v e m o l e c u l eE - c a d h e r i n a n di n h i b i t e d a c t i v i t y o f P I - 3 k i n a s eb yd e c r e a s i n gt h e e x p r e s s i o no f p h o s