2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、本研究采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)137例具有神經(jīng)浸潤(rùn)的胰腺導(dǎo)管腺癌組織標(biāo)本中p75NGFR、TrkA、JNK、NF-κB的表達(dá),分析p75NGFR與胰腺癌臨床病理學(xué)參數(shù)之間和p75NGFR與TrkA、JNK、NF-κB之間的關(guān)系;采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染p75NGFR的胰腺癌細(xì)胞株,觀察p75NGFR對(duì)胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為、裸鼠成瘤以及成瘤后腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響,為進(jìn)一步研究p75NGFR作為胰腺癌基因治療靶點(diǎn)的潛在臨床價(jià)值提供了較

2、好的細(xì)胞生物學(xué)平臺(tái)和可靠的理論學(xué)基礎(chǔ)。 目的:探討NGF低親和力受體p75NGFR在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:采用免疫組織化學(xué)技術(shù)研究p75NGFR、TrkA、JNK和NF-κB在137例伴神經(jīng)浸潤(rùn)的胰腺癌及其癌旁組織中的表達(dá)和分布,所得數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件的PearsonCorrelationTest和Kruskal-Wallis進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,分析p75NGFR的表達(dá)與胰腺癌多種臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系和胰腺

3、癌組織中p75NGFR、TrkA、JNK和NF-κB之間的相互關(guān)系;采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將p75NGFR的cDNA導(dǎo)入SW1990胰腺癌細(xì)胞,建立穩(wěn)定表達(dá)p75NGFR的胰腺癌細(xì)胞株,通過(guò)觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線、克隆形成能力、PCNA增殖指數(shù)、細(xì)胞周期等改變判斷p75NGFR對(duì)胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響;用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法建立裸鼠皮下腫瘤和胰腺原位移植腫瘤模型,觀察p75NGFR對(duì)體內(nèi)胰腺癌形成、生長(zhǎng)和侵襲轉(zhuǎn)移的作用。結(jié)果:①p75NGFR、

4、TrkA、JNK、NF-κB在癌旁胰腺組織中的分布:p75NGFR免疫反應(yīng)陽(yáng)性信號(hào)分布于癌旁胰腺外分泌部腺泡細(xì)胞的基底膜(強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng))、小葉間導(dǎo)管上皮細(xì)胞的胞漿、胰島部分細(xì)胞的胞漿(呈弱到中度陽(yáng)性)、問(wèn)質(zhì)的神經(jīng)纖維(強(qiáng)陽(yáng)性);TrkA免疫反應(yīng)陽(yáng)性信號(hào)廣泛表達(dá)于癌旁胰腺外分泌部腺泡細(xì)胞的胞漿、各級(jí)導(dǎo)管上皮細(xì)胞胞漿、胰島細(xì)胞胞漿、間質(zhì)神經(jīng)纖維(呈弱陽(yáng)性);JNK和NF-κB在癌旁胰腺組織的閏管上皮細(xì)胞的胞漿/胞膜、小葉內(nèi)/間導(dǎo)管上皮細(xì)胞的胞

5、漿/胞膜。②p75NGFR、TrkA、JNK、NF-κB在癌組織中的分布:p75NGFR和TrkA分別表達(dá)于胰腺癌細(xì)胞的胞漿/胞膜和間質(zhì)的神經(jīng)纖維,在癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率分別為18.2%和84.7%。JNK和NF-κB分布于胰腺癌細(xì)胞的胞漿,癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為55.5%和61.3%。③癌組織中p75NGFR、TrkA和NF-κB的表達(dá)越多,神經(jīng)浸潤(rùn)的程度越嚴(yán)重(p=0.00;p=0.034;p=0.04);p75NGFR的表達(dá)與T

6、rkA、JNK和NF-κB表達(dá)呈正相關(guān)(p=0.021;p=0.00;p=0.001)。④免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)在轉(zhuǎn)染p75NGFR基因的胰腺癌細(xì)胞中檢測(cè)到p75NGFR免疫反應(yīng)陽(yáng)性信號(hào);WesternBlot在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中檢測(cè)到p75NGFR陽(yáng)性的條帶;MTT法檢測(cè)到轉(zhuǎn)染p75NGFR的細(xì)胞生長(zhǎng)較未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞或只轉(zhuǎn)染載體的細(xì)胞顯著減慢(p<0.01);克隆形成能力顯著降低(p=0.042;p=0.002);細(xì)胞增殖指數(shù)顯著減小(p=0.00

7、59;p=0.0472)。⑤分別與未轉(zhuǎn)染細(xì)胞和只轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞比較,轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在裸鼠皮下成瘤時(shí)間無(wú)顯著性差異,3周后形成的腫瘤顯著較小(p=0.00);胰腺原位腫瘤模型成瘤率顯著降低,無(wú)腹水形成,4周后腫瘤顯著較小(p=0.00),組織學(xué)上未見(jiàn)腫瘤衛(wèi)星灶形成,未見(jiàn)血管浸潤(rùn),未見(jiàn)臨近器官及正常胰腺組織的浸潤(rùn),但癌組織分化差,細(xì)胞呈條索狀排列,未見(jiàn)腺樣結(jié)構(gòu)或腺管結(jié)構(gòu)形成。⑥分別與未轉(zhuǎn)染細(xì)胞和只轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞比較,流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染

8、的細(xì)胞G0/G1、G2期細(xì)胞數(shù)顯著增多,S期細(xì)胞數(shù)顯著減少,凋亡期細(xì)胞數(shù)明顯增多,(x2=2730.27,p<0.01;x2=166.49,p<0.01;);在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中JNK和NF-κB表達(dá)顯著增多,TrkA表達(dá)水平變化不顯著;u87細(xì)胞可吸引轉(zhuǎn)染的細(xì)胞定向遷移(p=0.00)。結(jié)論:①p75NGFR分布于癌旁胰腺組織的腺泡細(xì)胞、各級(jí)導(dǎo)管部分上皮細(xì)胞的胞漿或胞膜、胰島的部分上皮細(xì)胞的胞漿、間質(zhì)的神經(jīng)纖維;分布于癌組織癌細(xì)胞的胞漿或胞

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