一個先天性垂體性侏儒癥家系的分子遺傳學分析.pdf

1、先天性垂體性侏儒癥是指下丘腦、垂體前葉病變引起的生長激素分泌節(jié)律、數(shù)量的異常、生長激素受體缺陷，或受體后信息傳遞障礙等所引起的生長發(fā)育遲緩性疾病。先天性垂體性侏儒癥包括兩種類型：單一性生長激素缺乏癥(Isolated Growth Hormone Deficiency，IGHD)和垂體激素缺乏綜合癥(Combined Pituitary Hormone Deficiency，CPHD)，IGHD又分為IGHD IA型，IGHD IB型，

2、IGHD II型，IGHD III型。目前對垂體性侏儒癥的治療主要依靠注射生長激素或者促生長激素釋放激素來達到增長身高的目的。先天性垂體性侏儒癥的遺傳方式有常染色體顯性遺傳，常染色體隱性遺傳和X染色體遺傳，其中常染色體隱性遺傳是最常見的一種，目前已發(fā)現(xiàn)該疾病的致病基因有17個。 本課題組在湖北省收集了一個常染色體隱性遺傳先天性垂體性侏儒癥家系，為了尋找該家系的致病原因，首先對已發(fā)現(xiàn)17個與先天性垂體性侏儒癥有關的基因進行連鎖分析

3、，發(fā)現(xiàn)該家系的致病基因與生長激素釋放激素受體（Growth hormone releasing hormone receptor，GHRHR）基因緊密連鎖，GHRHR基因可能是該家系的致病基因。通過對該基因的所有外顯子及外顯子與內含子交界處進行直接測序，結果發(fā)現(xiàn)了一個新的剪接突變IVS8+1G→A，通過限制性內切酶多態(tài)性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析發(fā)現(xiàn)該突變在家系內與

4、疾病共分離，并且在50個正常人中也未發(fā)現(xiàn)該突變的存在。為了檢測剪接突變IVS8+1G→A的剪接機制，從正常人和患者的基因組中分別構建一個包含突變點微小基因，再將構建好的基因轉染進入Hela細胞模擬人體內剪接的方式獲取RNA，進行RT-PCR和測序分析，結果發(fā)現(xiàn)該突變導致剪接方式的改變，形成了5種新的RNA，一種是截短了的將第8號外顯子刪除的RNA，第二種是加長了來自8號內含子的48bp的RNA，第三種是加長了來自8號內含子的46bp的R