應用測序聯(lián)合MLPA技術對一個先天性無虹膜癥家系的PAX6基因的研究.pdf

1、目的：應用測序聯(lián)合多重連接探針擴增(multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA)技術對一個先天性無虹膜癥家系進行分子遺傳診斷。
　　方法：對參加研究的一個先天性無虹膜癥家系的3個患者、1個非患者及3個無血緣關系的正常對照志愿者進行全面眼部檢查，明確診斷，并收集患者臨床資料。所有研究參與者均抽取靜脈全血提取基因組DNA。將先證者進行PAX6基因外顯子測序，測序的范圍包括

2、外顯子及外顯子與內(nèi)含子交界處。將2個患者、1個非患者家系成員及3個無血緣關系的正常對照者采用SALSA MLPA P219PAX6 probemix試劑盒對PAX6基因及其附近染色體區(qū)域進行MLPA。
　　結(jié)果：ANC先天性無虹膜癥家系發(fā)病眼除虹膜部分或全部缺失外，合并眼球水平震顫，間歇性外斜視，角膜內(nèi)皮細胞明顯減少、失去六邊形形態(tài)，晶狀體混濁，黃斑中心凹發(fā)光消失、厚度變薄，視功能嚴重受損。先證者PAX6基因外顯子及外顯子與內(nèi)含子

3、交界處未發(fā)現(xiàn)基因突變。2個患者在PAX6基因1號內(nèi)含子至5號外顯子發(fā)現(xiàn)染色體片段雜合缺失，而非患者家系成員未發(fā)現(xiàn)該雜合缺失。該雜合缺失可能導致了翻譯起始密碼子的丟失，進而導致PAX6蛋白單倍體劑量不足，從而導致先天性無虹膜癥。
　　結(jié)論： ANC先天性無虹膜癥家系發(fā)病眼除虹膜部分或全部缺失外，常合并角膜、晶狀體及黃斑病變，視功能嚴重受損。PAX6基因5'端染色體片段雜合缺失可能導致該家系的先天性無虹膜癥，該雜合缺失目前尚未見報道。