沉默Survivin基因?qū)Υ竽c癌HCT-8-VCR耐藥細(xì)胞凋亡及藥物敏感性影響的初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文沉默Survivin基因?qū)Υ竽c癌HCT-8/VCR耐藥細(xì)胞凋亡及藥物敏感性影響的初步研究姓名：鄭欣申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系統(tǒng)疾?。┲笇?dǎo)教師：郭文20080515中文摘要題?；蛑委熓悄孓D(zhuǎn)腫瘤耐藥的重要策略之一。S u r v i v i n 是凋亡抑制蛋I 蘭t ( I A P ) 家族新成員，具有3 個(gè)主要特點(diǎn)：1 、S u r v i v i n基因是迄今發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的凋亡抑制因子。2 、在有絲分裂

2、的開始，S u r v i v i n 維護(hù)有絲分裂的正常進(jìn)行，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖3 、S u r v i v i n 參與毛細(xì)血管網(wǎng)的形成，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管生成。S u r v i v i n m R N A 和蛋白幾乎在所有被研究的腫瘤細(xì)胞中過度表達(dá)，如肺癌、胃癌、大腸癌、乳腺癌、卵巢癌、腎腫瘤及黑色素瘤等，在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及化療耐藥中起重要作用。T h o m b e r r y 和L a z e b n i k

3、 的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，c a S p a s e 活化的凋亡通路與化療藥物敏感性有密切關(guān)系，凋亡抑制基因表達(dá)上調(diào)或凋亡促進(jìn)基因表達(dá)下調(diào)所導(dǎo)致的凋亡反應(yīng)性降低是腫瘤細(xì)胞耐藥的原因之一。另有實(shí)驗(yàn)證明下調(diào)S u r v i v i n 的表達(dá)可增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H 5 2 0 對順鉑的化療敏感性。S u r v i v i n 主要通過3 種方式直接或間接抑制c a s p a s e s 活性而發(fā)揮抗凋亡作用：1 、S u r v i v i n

4、 以同源二聚體的形式與終末效應(yīng)器C a s p a s e s ．3 、C a s p a s e s 一7 形成穩(wěn)定的結(jié)合，從而抑制二者的蛋白切割作用，阻斷來自F a s ／F a s L 通路和( 或) 線粒體通路的凋亡信號，阻斷腫瘤細(xì)胞凋亡。2 、以S M A C 作為中介與C a s p a s e s ．9 結(jié)合抑制其活性3 、與細(xì)胞周期蛋白激酶c d k 4 、p 3 4 c d c 2 相互作用，使p 2 1 從C D K

5、 4 的復(fù)合體釋放出來，p 2 1 進(jìn)一步與線粒體c a s p a s e ．3 結(jié)合，抑制其活性，使細(xì)胞凋亡受到抑制。K N A 干擾( R N Ai n t e r f e r i n g ，R N A i ) 技術(shù)為近年基因表達(dá)調(diào)控的研究熱點(diǎn)，它將與目的基因m R N A 序列互補(bǔ)的小分子干擾核糖核酸( s m a l l i n t e r f e r e n c eR N A ，s i R N A ) 或短發(fā)夾R N A (

6、 s h o r t h a i r p i n R N A ，s h R N A ) 導(dǎo)入靶細(xì)胞，通過序列互補(bǔ)配對法則特異性降解目的基因，抑制序列特異性的基因表達(dá)。R N A i 可以沉默癌基因、促進(jìn)凋亡、調(diào)控細(xì)胞周期、抗血管生成。近年研究表明利用R N A i技術(shù)是S u r v i v i n 基因沉默的有力手段，且其作用強(qiáng)大、迅速。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用R N 處技術(shù)阻斷結(jié)腸癌細(xì)胞( L o v o ) 中S u r v