LncRNA-HOTAIR對(duì)大腸癌CCL244細(xì)胞增殖侵襲力及輻射敏感性的影響.pdf

1、目的：探究長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR對(duì)大腸癌CCL244細(xì)胞增殖侵襲及輻射敏感性的影響。
　　方法：應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)53例大腸癌腫瘤組織、53例對(duì)應(yīng)癌旁正常組織、四株大腸癌細(xì)胞（HCT116、CCL244、SW480、DLD-1）及正常腸粘膜細(xì)胞(FHC)中HOTAIR的相對(duì)表達(dá)量。通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染將化學(xué)合成的人HOTAIR siRNA及陰性對(duì)照轉(zhuǎn)染至大腸癌細(xì)胞CCL244中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證下調(diào)效果。MTT法

2、、克隆形成實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)檢測(cè)下調(diào) HOTAIR對(duì)細(xì)胞增殖的影響。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)下調(diào)HOTAIR對(duì)細(xì)胞侵襲遷移的影響。克隆形成聯(lián)合輻照檢測(cè)下調(diào)HOTAIR對(duì)細(xì)胞輻射敏感性的影響。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)下調(diào)HOTAIR對(duì)輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的影響。Western blot檢測(cè)下調(diào)HOTAIR對(duì)細(xì)胞凋亡及遷移相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：相較于53例對(duì)應(yīng)癌旁正常組織及正常腸粘膜細(xì)胞，在53例腫瘤組織及四株腫

3、瘤細(xì)胞中HOTAIR高表達(dá)。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染siRNA顯著降低CCL244細(xì)胞中HOTAIR表達(dá)量。下調(diào)HOTAIR抑制CCL244細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，抑制CCL244細(xì)胞侵襲遷移，促進(jìn)輻射誘導(dǎo)的CCL244細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)CCL244細(xì)胞的輻射敏感性，抑制遷移相關(guān)蛋白MMP2、MMP9的表達(dá)，抑制抗凋亡基因Bax的蛋白表達(dá)而促進(jìn)促凋亡基因Bcl-2的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)論：HOTAIR在大腸癌腫瘤組織及細(xì)胞中高表達(dá)，下調(diào) HOTAIR可抑制大腸癌