低氧預處理對大鼠局灶性腦缺血損傷保護機制的實驗研究.pdf

1、背景和目的：腦血管病是嚴重危害人類生命健康、致死率及致殘率高的主要疾病,其中缺血性腦血管病約占70％左右。近年來,隨著缺血性腦血管病發(fā)病機制研究的日益深入,其治療方面已有了長足的進步,但是仍有很多機制尚不清楚,并缺乏有效的治療及預防手段。對發(fā)病機制的研究及如何啟動內(nèi)源性保護機制以及尋找有效的防治手段仍然是該領域研究的重點。研究發(fā)現(xiàn),預先給予短暫的、亞致死量的缺氧(低氧預處理,Hypoxia preconditioning)可減輕其后發(fā)生

2、的嚴重缺血所造成的組織損傷,即缺血耐受現(xiàn)象。缺血耐受研究的主要途徑是選擇不同種屬動物通過不同手段建立腦缺血耐受模型。由于大鼠腦血管與人腦相似,均由頸動脈在腦底吻合成動脈環(huán),再通過其分支共同完成腦供血。因此,國內(nèi)外很多學者采用不同方法制備了大鼠大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion.MCAO)模型,而頸內(nèi)動脈線栓法制備的腦梗塞動物模型,由于其局部條件可以控制,可模擬臨床腦中風病人的各種癥狀,成為研

3、究腦缺血損傷的病理機制和藥理學實驗極為有價值的工具。本實驗參照Zea Longa腔內(nèi)線拴法,結合臨床實際,在以往線栓法基礎上加以改進,制備了MCAO模型。同時在MCAO模型前48h進行不同時間的缺氧預處理,采用神經(jīng)病學評分、TTC染色測定梗死范圍、HE染色觀察病理變化,腦水腫程度和腦梗塞體積的測定,缺氧誘導因子-1α表達檢測等對低氧預處理對大鼠局灶性腦缺血損傷保護機制,進行探討。
　　方法：1、動物分組:選擇成年SD大鼠130只,

4、分為假手術組10只,缺血再灌注組60只,低氧預處理+缺血再灌注組60只。2、低氧預處理+缺血再灌注組動物按照Vannucci.R.C等的方法進行低氧預處理動物模型制作。3、缺血再灌注組和低氧預處理+缺血再灌注組動物參照Zea longa的方法制作MCAO動物模型。假手術組只進行手術操作不進行缺血和再灌注。4、對各組動物在相應的時間點進行神經(jīng)功能評分、腦梗塞體積測定、腦組織含水量測定、HIF-1α免疫組織化學檢測及圖象分析和病理學組織觀察

5、。
　　結果：1、低氧預處理組與缺血再灌注組比較,神經(jīng)功能障礙減輕。缺血側低氧預處理組腦組織含水量較缺血再灌注組明顯降低。在24h和48h兩個時間點,缺血側低氧預處理組腦梗死體積較缺血再灌注組明顯減少。2、HIF-1α蛋白表達檢測表明,缺氧預處理組在缺血再灌注后2h即高于同期缺血再灌注組,48h仍維持在較高水平,在同一時間點與缺血再灌注組比較均有顯著性差異。
　　結論：1、缺氧預處理可以誘導腦對短暫性局灶性缺血產(chǎn)生耐受性,改