腺病毒介導(dǎo)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B基因轉(zhuǎn)染慢性缺血心肌血管新生的研究.pdf

1、缺血性心臟病(IHD)是當(dāng)代人類(lèi)發(fā)病率和致死率較高的疾病之一.基因治療是目前研究的熱點(diǎn),腺病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移優(yōu)于直接應(yīng)用蛋白和質(zhì)粒載體,為了探討腺病毒介導(dǎo)VEGF-B基因?qū)θ毖募〉男难苄律饔?我們首先構(gòu)建了編碼人VEGF-B基因的復(fù)制缺陷的重組腺病毒(Ad.VEGF-B)載體,在體外研究證實(shí)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有促增殖作用的基礎(chǔ)上,直接注射豬慢性缺血心肌以評(píng)價(jià)在體應(yīng)用的效果.主要結(jié)論如下:1、應(yīng)用RT-PCR技術(shù)選擇目的基因高豐度的組

2、織可獲得該基因的編碼序列cDNA,磷酸鈣共沉淀法結(jié)合先進(jìn)的COS/DNA-TPC技術(shù)可有效地將外源基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞中,獲得復(fù)制缺陷的重組腺病毒載體效率高、高滴度和低毒性.2、我們首次構(gòu)建了攜帶VEGF-B基因的復(fù)制缺陷的重組腺病毒載體,在體外有效地感染心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞,同時(shí)VEGF-B基因得到成功轉(zhuǎn)錄和表達(dá),進(jìn)一步證實(shí)VEGF-B有促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用.3、該研究首次將Ad.VEGF-B直接注射到缺血心肌,并證實(shí)可促進(jìn)局部