重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的反義血管內(nèi)皮生長因子-,165-抑制角膜新生血管的實驗研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的反義血管內(nèi)皮生長因子抑制角膜新生血管的實驗研究姓名：周煉紅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科指導(dǎo)教師：胡燕華20040501華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文剪接方式來自同一基因，VEGFl2l和VEGFl65怒可溶性蛋囪，其中VEGFl65是最主娶麴巽梅奉，天然懿VEGF鼯表理出VEGFm的主要特性。VEGF是一種商液特異性的盛管內(nèi)皮細(xì)胞肖絲分裂素，與其受體結(jié)含后，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移的作用

2、，從而加速新生血管的形成，VEGF在體內(nèi)，還縣有增宓鑫管逶透性戇修，孽l。因此，在缺氧、炎痰及外強(qiáng)等媾況下，vEGF霹促進(jìn)出斑、漏血和不成熟的新生血管形成。由于VEGFl65在皿管生成的生理和病理過程中起中心調(diào)控作用，我們試圖逶過隰叛VEGF㈦粒l乍弼，鼓露季【|l利病理狀況下角膜瑟壘纛管的形殘。爨1990年美國的一名腺苷脫氨酶歌乏癥患者接受基因治療并獲得成功后，艇因治療已取得很大的j敷展。所謂基因治療是指通j過在特定靶細(xì)胞中表達(dá)該細(xì)胞

3、本來不表達(dá)懿基因，袋采蔫特定方式關(guān)凌、李露鍵舅鬻表達(dá)懿鏊因，達(dá)翼浚療疾病的目的。限作為基因治療的靶器官，具有與生俱來的優(yōu)越性，眼球閡其屈光問質(zhì)透明，位鍶表淺易于接j慝，可進(jìn)行精確的定位轉(zhuǎn)染，亦有利于纂因轉(zhuǎn)移遭壤夔褒寨。勞燕羲痔是免痰教受區(qū)，爨蠢戇臻懿免疫舉特性，鴦潮予目的基因的轉(zhuǎn)染及襲達(dá)。目前跟瘸的基因治療研究方興未=i=，基因治療所需的關(guān)鍵技術(shù)，便是能將外源的目的基本轉(zhuǎn)移到人體，并能有效地適度表達(dá)，困魏載臻技本在基鬻治療中占鴦一分重要

4、戇逡經(jīng)。理想戇魏髂應(yīng)該是能將霾的基因辱入相應(yīng)靶器官，并安全、有效和長期穩(wěn)定的表達(dá)。本研究利用重組腺相關(guān)病毒(rAAV)作為基因治療的裁體，使用反義RNA羧零，疆顴毅黛鑫譬彩或避稷中VEGF豹l車瘸，簌毳蟄蘩l純學(xué)澆痿蕊霜膜新生施管的形成。熬個研究分為三部分。第～部分，高滴度重組腺相關(guān)病毒的包裝、純化及滴發(fā)測定。本研究所采弱豹rAAV是一耱凝型夔，專廣泛痤愛茲豢豹萋囂浚療懿簸缽，莢密主范圍廣，使用安全，無致病性和免痰源性，其最大的特點是可