脾主運(yùn)化水液與胃粘膜水通道蛋白3、4表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、祖國(guó)醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為：脾(胃)為臟象學(xué)說(shuō)的核心，主運(yùn)化。按現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論分析，脾(胃)是一個(gè)生理學(xué)和(或)病理學(xué)的概念，是以消化系統(tǒng)為主的多系統(tǒng)的功能綜合單位。 近30多年來(lái)，關(guān)于脾本質(zhì)的研究，證型上多集中在脾虛證，功能上多集中在脾主運(yùn)化水谷的研究。對(duì)“脾主運(yùn)化水液”的研究能揭示其生理機(jī)制和分子生物學(xué)基礎(chǔ)，進(jìn)一步補(bǔ)充“脾主運(yùn)化”的研究。 一、文獻(xiàn)研究 脾(胃)在水液代謝中的重要作用，可用“脾主運(yùn)化水液”來(lái)概括。脾主運(yùn)化

2、水液，包括“化”和“運(yùn)”兩個(gè)方面。通過(guò)“脾的化”，能夠把水谷物的液態(tài)成份轉(zhuǎn)化成水液，能夠把水液化生為唾、汗、尿、消化液及其它的生理性液體。通過(guò)“脾的運(yùn)”，能夠把津液和多余的水液轉(zhuǎn)輸至肺、腎和全身?！捌⒅鬟\(yùn)化水液”的功能健旺，是“脾主運(yùn)化”的重要組成部分，可防止體內(nèi)水液不正常的停滯，防止?jié)?、痰、飲等病理產(chǎn)物的生成，對(duì)于維持體內(nèi)津液平衡起著重要作用。 水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)是生物膜上特異性轉(zhuǎn)運(yùn)水的整合蛋白。它們

3、在機(jī)體的分布廣泛，大多選擇性地分布在那些與體液吸收、分泌有關(guān)的上皮細(xì)胞中，以及可協(xié)同跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)皮細(xì)胞中，執(zhí)行著各部位的水分重吸收、液體分泌的功能，對(duì)維持細(xì)胞、組織、器官及全身的水平衡起著決定性作用。水通道蛋白與水代謝密切相關(guān)，與中醫(yī)理論的肺、脾、腎等臟相關(guān)。如果不同組織細(xì)胞膜上的AQPs表達(dá)超過(guò)或低于正常水平，都會(huì)影響水的分泌或吸收，出現(xiàn)局部的或全身的水平衡紊亂。 因此，通過(guò)津液代謝和水平衡這一中心環(huán)節(jié)，“脾主運(yùn)化水液”和A

4、QPs必然存在著某種聯(lián)系：水通道蛋白的正常表達(dá)可能是脾主運(yùn)化水液的分子生物學(xué)基礎(chǔ)；若水通道蛋白表達(dá)異常，脾主運(yùn)化水液可能出現(xiàn)異常，成為脾虛濕困、寒濕困脾、脾胃濕熱、胃陰不足等病證的發(fā)生機(jī)制之一。 近年來(lái)，人們從中醫(yī)學(xué)的角度對(duì)水通道蛋白進(jìn)行了很多有益的探討，但需要進(jìn)一步深入。 二、臨床實(shí)驗(yàn)研究 本實(shí)驗(yàn)中，采用熒光定量PCR技術(shù)(FQ-PCR)，通過(guò)檢測(cè)中醫(yī)不同證型和脾胃濕熱證不同程度慢性淺表性胃炎患者胃粘膜中AQP

5、3、AQP4的基因表達(dá)，以正常組為對(duì)照；同時(shí)，選取脾主運(yùn)化水液失常所導(dǎo)致的常見(jiàn)癥狀、體征作為一組變量，AQP3、AQP4做為另一組變量，進(jìn)行典型相關(guān)分析。 研究對(duì)象的診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)、病例來(lái)源均相同。所有病例均來(lái)源于廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院門(mén)診和住院部；正常人作為對(duì)照，來(lái)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)志愿學(xué)生。所有受試對(duì)象均簽訂知情同意書(shū)。 實(shí)驗(yàn)一、慢性淺表性胃炎不同證型與AQP3、AQP4基因表達(dá)的關(guān)系 研究對(duì)

6、象：脾胃濕熱證組24例，脾虛濕困組10例，寒濕困脾組10例，胃陰不足組8例，正常人8例。 方法：胃鏡下取胃體上部粘膜，液氮罐保存，熒光定量PCR法檢測(cè)AQP3、AQP4在胃組織中的mRNA表達(dá)量。 結(jié)果：脾胃濕熱證組AQP3、AQP4高于胃陰不足證組和正常人組(P＜0.05；0.01)，脾虛濕困證組、寒濕困脾證組AQP3均高于胃陰不足證組(P＜0.05；0.01)，脾虛濕困證組AQP4高于胃陰不足證(P＜0.05)，寒濕

7、困脾證組AQP4均數(shù)高于胃陰不足證組但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；脾虛濕困證組、寒濕困脾證組AQP3、AQP4均數(shù)雖然高于正常人組，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；脾胃濕熱證組、脾虛濕困證組、寒濕困脾證組三組間AQP3、AQP4比較沒(méi)有明顯差異(P＞0.05)；胃陰不足證組和正常人組間AQP3、AQP4比較也沒(méi)有明顯差異(P＞0.05)。 實(shí)驗(yàn)二慢性淺表性胃炎脾胃濕熱不同程度與AQP3、AQP4基因表達(dá)的關(guān)系 研究

8、對(duì)象：脾胃濕熱證輕度組8例，脾胃濕熱證中度組8例，脾胃濕熱證重度組8例，正常人8例。 方法：胃鏡下取胃體上部粘膜，液氮罐保存，熒光定量PCR法檢測(cè)AQP3、AQP4在胃組織中的mRNA表達(dá)量。 結(jié)果：脾胃濕熱中度組、重度組AQP3、AQP4基因表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組和脾胃濕熱輕度組(P＜0.05；0.01)；正常對(duì)照組和脾胃濕熱輕度組之間AQP3、AQP4無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；脾胃濕熱重度組AQP4均數(shù)高于脾胃

9、濕熱中度組，但無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；脾胃濕熱重度組AQP3高于脾胃濕熱中度組(P＜0.05)。 實(shí)驗(yàn)三慢性淺表性胃炎癥狀、體征與AQP3、AQP4基因表達(dá)的關(guān)系 研究對(duì)象：慢性胃炎52例，正常人8例。 方法：利用SPSS11.5軟件，建立數(shù)據(jù)文件。變量有：編號(hào)、年齡、性別、舌質(zhì)(SZ)、舌苔厚薄(STHB)、舌苔范圍(STFW)、肢體困重(ZTKZ)、神疲乏力(SPFL)、大便性狀(DBXZ)、AQP3、

10、AQP4。兩組等級(jí)變量相關(guān)分析采用典型相關(guān)分析。 結(jié)果：舌苔范圍、舌苔厚薄、肢體困重依次由大到小與AQP3相關(guān)，舌苔范圍、肢體困重、舌苔厚薄依次由大到小與AQP4相關(guān)；舌苔范圍對(duì)典型變量組1的典型變量1影響最大。 三、結(jié)論 1、慢性胃炎中醫(yī)證型不同，胃粘膜AQP3、AQP4基因表達(dá)不同，胃粘膜AQP3、AQP4可能成為脾虛濕困、寒濕困脾、脾胃濕熱、胃陰不足等病證的發(fā)生機(jī)制之一。 2、脾胃濕熱組、脾虛濕困組

11、、寒濕困脾組AQP3、AQP4基因表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組和胃陰不足組，提示AQP3、AQP4與中醫(yī)的“水濕、津液”有某種內(nèi)在的聯(lián)系，胃粘膜AQP3、AQP4的過(guò)高或過(guò)低表達(dá)是機(jī)體對(duì)水液代謝全身調(diào)節(jié)的局部表現(xiàn)。 3、脾胃濕熱組、脾虛濕困組、寒濕困脾組三組間AQP3、AQP4基因表達(dá)沒(méi)有差異，提示AQP3、AQP4主要與水濕有關(guān)，沒(méi)有脾胃寒熱虛實(shí)證候的特異性。 4、脾胃濕熱程度不同，胃粘膜AQP3、AQP4基因表達(dá)不同。脾