C反應蛋白在代謝綜合征及其靶器官損害中的作用.pdf

1、背景和目的代謝綜合征(metabolicsyndrome，MS)具有多重心血管危險因素聚集的特征，其危害性明顯大于單一成分。近年來國內(nèi)外MS發(fā)病率呈急劇上升趨勢，已成為當今主要的社會現(xiàn)象和公共衛(wèi)生問題之一，研究MS的流行病學趨勢、危險因素、發(fā)病特征、病理生理機制對指導MS的治療、預防及預后均具有重要的意義。目前觀點認為MS是環(huán)境因素和遺傳因素相互作用的結果，飲食方式不當和運動減少對MS的發(fā)生發(fā)展可能起著重要作用。MS發(fā)病環(huán)節(jié)復雜，發(fā)生機

2、制仍不清楚，胰島素抵抗(insulinresistance，IR)是MS的中心環(huán)節(jié)。 研究表明，MS是一種全身性慢性低度炎癥性疾病狀態(tài)，炎癥在MS的發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用。許多炎癥因子如IL-6、IL-1、TNF-α及CRP等與MS及組分之間關系密切，CRP在MS中的作用倍受關注。CRP是一種急性炎癥時相反應蛋白，是先天性免疫防御因子之一，可以通過經(jīng)典途徑激活補體，消耗補體，釋放炎癥介質(zhì)；活化淋巴細胞；激活血小板等。CRP在

3、肝臟、胰腺、脂肪組織、心肌和血管等組織中均有表達，它的合成和表達受激活的單核細胞、成纖維細胞及某些細胞因子(如IL-6、IL-1β、IL-8、轉化生長因子-β(TGF-β)和TNF-α等)的調(diào)控，其中IL-6和TNF-α是CRP合成和分泌的主要刺激物。血清CRP基線水平在健康人群中可以比較準確地預測未來心臟病、中風、心臟猝死危險性和外周血管性疾病的發(fā)生情況。由于CRP與MS及其組分的關系密切，且為重要的炎癥因子，因此CRP有可能成為MS

4、發(fā)生的靶分子之一。血清CRP濃度與MS的組分數(shù)量及其靶器官損害之間、CRP基因變異與MS及其組分之間的關系仍不明確；CRP是否可以作為MS的獨立危險因素和預后的預報因子也尚未闡明；CRP促進MS的發(fā)生發(fā)展的病理生理和分子機制仍然不明。因此，本研究采用回顧性研究明確CRP與MS及其靶器官損害之間的關系，并明確了CRP是否可以作為MS的危險因素；通過建立與人類相近的MS大鼠，從分子水平探討CRP在MS發(fā)生發(fā)展中的作用。 對象與方法一

5、、臨床研究①受試者801例，其中男性393例，女性408例。MS患者404例，男132例，女272例，年齡54.5±13.7歲；非MS患者397例，男261例，女136例，年齡58.0±12.8歲。MS的診斷標準采用NCEPATPⅢ指南標準，其中腹圍的診斷標準采用亞太地區(qū)標準。②常規(guī)檢測高敏C反應蛋白(high-sensitivityCRP,hs-CRP)、BP、腹圍、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、UAER，其中469例行

6、頸動脈超聲檢測IMT，429例行超聲心動圖檢測心臟結構和功能。③采用PCR-RFLP技術進行CRP基因1059位G/C多態(tài)性檢測。 二、實驗研究①一般資料：健康2月齡雄性Wistar大鼠40只，隨機分為普食對照組(ND)和高脂飲食組(HF)，每組20只。以長期(52周)高脂(脂肪占總熱能49％)高鹽飲食復制MS模型，測量大鼠體重、血壓、心率、空腹血糖、血脂，行高胰島素一正常血糖鉗夾試驗。②靶器官損害指標：血流動力學(HR、LVS

7、P、LVEDP和±dp/dtmax)檢測心功能；油紅O染色觀察動脈粥樣斑塊形成狀況；用代謝籠喂養(yǎng)收集24h尿液檢測微量蛋白尿。③分子生物學指標：心臟、主動脈、白色脂肪組織和棕色脂肪組織CRPmRNA和蛋白表達。 主要研究結果一、臨床研究1.一般臨床資料：MS組的腹圍、TC、TG、LDL-C、SBP、DBP、FPG以及反映靶器官損害指標的LVMI、IMT、UAER明顯高于非MS組，HDL-C明顯低于非MS組，MS組的平均年齡高于非

8、MS組(P＜0.05或P＜0.01)。 2.hs-CRP與MS組分數(shù)量之間的關系：血清hs-CRP水平隨著MS組分數(shù)量的增加而升高(P＜0.001)。 3.MS組分對hs-CRP的影響：當各單項指標達到MS診斷標準時，血中hs-CRP濃度明顯上升(P＜0.05或P＜0.01)。 4.hs-CRP水平與MS各組分之間的相關性：血清hs-CRP水平與腹圍、TG、BP、FPG呈正相關，而與HDL-C呈負相關(P＜0.0

9、5或P＜0.01)。 5.hs-CRP可作為MS的危險因素：①隨著血清hs-CRP水平的升高，MS的危險性亦隨之上升(P＜0.01)；②高hs-CRP水平促進MS的發(fā)生(OR=1.155，95％CI=(1.107，1.206)，P＜0.01.)；③根據(jù)有無MS分層描繪ROC曲線，計算ROC曲線下面積為0.72(95％CI0.69-0.76，P＜0.001)；④MS患者CRP最佳臨界診斷點為3mg/L診斷靈敏度為55.7％，特異性

10、為78.1％。 6.hs-CRP水平與MS靶器官損害的相關性：血清hs-CRP水平與IMT、LVMI和UAER呈正相關。 7.CRP1059G/C基因多態(tài)性與MS的關系：①GG、GC基因型(因CC基因型極為罕見而在本研究中未發(fā)現(xiàn))分布頻率為90.9％、9.1％，G、C等位基因的分布頻率為95.45％、4.55％；MS組與非MS組的1059G/C基因型和等位基因的分布趨勢相同(P＞0.05)。②GG基因型的血清hs-CRP

11、水平顯著高于GC基因型(P＜0.05)；在MS組分中，GG基因型的SBP、腹圍、FPG高于GC基因型(P＜0.05)，而對MS其他組成成分及其靶器官損害無影響(P＞0.05)。 二、實驗研究1.MS大鼠的一般特征：HF組的體重、腹圍、腹部脂肪和棕色脂肪重量、Lee's指數(shù)、FAT％、TG、空腹血糖等指標均高于ND組，HDL-C低于ND組，基本符合人類MS臨床特征，組間比較有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 2.MS大鼠

12、靶器官損害狀況：HF組心臟、血管和腎臟損害比ND組更嚴重(P＜0.05或P＜0.01)。 3.RT-PCR結果：CRP基因在HF組心臟、白色脂肪組織和棕色脂肪組織的表達水平高于ND組，尤其在腸系膜中表達明顯增加(P＜0.05)，主動脈在高脂組有輕度上升(P＞0.05)。 4.Westernblot結果：CRP在HF組心臟、白色脂肪組織和棕色脂肪組織的蛋白表達水平高于ND組，尤其在心肌組織中表達明顯增加(P＜0.05)，而