淫羊藿甙對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松的作用及機制研究.pdf

1、骨折是骨質(zhì)疏松的嚴(yán)重后果，全球大約有2億人口罹患骨質(zhì)疏松癥，骨質(zhì)疏松癥及因骨質(zhì)疏松引起的骨折已成為全球所關(guān)注的有關(guān)公眾健康的重要問題。Cushing早在1932年最早報道垂體嗜堿細(xì)胞腺瘤患者出現(xiàn)激素相關(guān)性骨病，Cushing綜合征患者骨形成受抑而骨吸收增加。此后一系列的臨床研究也表明，器官移植術(shù)后接受大量免疫抑制劑的患者也易于發(fā)生骨折，大體解剖和組織形態(tài)學(xué)分析均證實，這部分患者術(shù)后丟失大量骨質(zhì)成分。糖皮質(zhì)激素類藥物包括甲基強的松龍、強的

2、松、地塞米松、氫化可的松等，不但應(yīng)用于器官移植術(shù)后，且在許多疾病的治療，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腎病綜合癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病中都具有不可替代的作用，其應(yīng)用幾乎涉及到臨床各科，糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也僅次于絕經(jīng)后及老年性骨質(zhì)疏松癥而居第3位，使用糖皮質(zhì)激素類藥物長程治療相關(guān)的骨質(zhì)疏松已經(jīng)成為臨床醫(yī)師關(guān)注的重要問題，應(yīng)用糖皮質(zhì)激素的同時，如何預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松都是臨床研究的重點，糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松的發(fā)病機制及其防治也越來越受到關(guān)注。

3、 我國內(nèi)分泌學(xué)和中西醫(yī)結(jié)合先驅(qū)鄺安墊教授在研究皮質(zhì)醇陽虛動物模型時發(fā)現(xiàn)補腎助陽中藥顯著改善皮質(zhì)醇動物的表型，提示中藥可能對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松具有治療作用。因此在課題的第一部分，我們研究了含淫羊藿復(fù)方對地塞米松磷酸鈉誘導(dǎo)的大鼠尿鈣磷排泄，血清堿性磷酸酶和胰島素樣生長因子一l，以及骨微結(jié)構(gòu)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)地塞米松磷酸鈉增加了大鼠尿鈣磷排泄，降低了血清胰島素樣生長因子—1水平，骨小梁間距增加，小梁變薄，排列紊亂。同時使用補腎中藥時

4、尿鈣磷排泄減少，血清胰島素樣生長因子—1水平增加，骨小梁間距減小，小梁增寬。提示補腎助陽中藥對糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松具有治療作用。 骨結(jié)構(gòu)的維持依賴成骨細(xì)胞的骨形成作用和破骨細(xì)胞的骨吸收作用之間的動態(tài)平衡，研究顯示成骨減少和成骨細(xì)胞功能下降是糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松形成的主要原因；而近年來大量文獻(xiàn)報告淫羊藿甙刺激成骨細(xì)胞增殖分化，但尚未見淫羊藿甙能否改善糖皮質(zhì)激素抑制的成骨細(xì)胞增殖分化的相關(guān)文獻(xiàn)。本課題的第二部分我們研究了淫羊藿

5、甙和地塞米松對原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性的影響，以及在此過程中ERK磷酸化的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20ug／L淫羊藿甙顯著增加了地塞米松抑制的成骨細(xì)胞堿性磷酸酶水平，同時增加ERK的磷酸化水平，而ERK的選擇性抑制劑PD98059顯著降低了淫羊藿甙刺激的堿性磷酸酶水平，提示激活EPK信號通路可能是淫羊藿甙促進(jìn)成骨細(xì)胞分化的機制之一。課題的第三部分研究了淫羊藿甙對小鼠來源的成骨細(xì)胞株MC3T3-E1的增殖分化的作用、MAPKs的三個并行通路

6、磷酸化水平的變化，同時觀察MAPKs選擇性(ERK—PD98058、JNK—SP600125、P38-MAPK-SB203580)抑制劑對淫羊藿甙刺激的成骨細(xì)胞增殖和分化的影響；進(jìn)一步研究受體酪氨酸激酶抑制劑SU5416對MAPKs磷酸化的和成骨細(xì)胞增殖分化的影響以評估受體酪氨酸激酶在淫羊藿甙刺激的成骨細(xì)胞增殖分化和MAPKs信號通路的作用；最后使用實時定量PcR觀察了SU5416和MAPKs抑制劑對淫羊藿甙刺激的一型膠原和骨鈣素表達(dá)的