胸導(dǎo)管引流及丹參多酚酸對重癥急性胰腺炎腎損傷影響的實驗研究.pdf

1、目的:重癥急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis，SAP)起病急驟，病情發(fā)展迅速，病死率高，患者多死于繼發(fā)感染和多臟器功能衰竭。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，具體的發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚。腎臟是重癥急性胰腺炎時最常受累的胰外器官之一，SAP并發(fā)急性腎損害(Acute Kidney Injury，AKI)比例高達(dá)53.9％，如進(jìn)一步發(fā)展為急性腎衰竭則病死率高達(dá)50％。急性腎損害已成為SAP重要死亡危險因素之一。其發(fā)病機(jī)制可能與

2、腎臟缺血缺氧、細(xì)菌內(nèi)毒素?fù)p傷、細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)對腎實質(zhì)的直接損傷，以及腎素-血管緊張素系統(tǒng)的激活和腎臟的微循環(huán)障礙等血流動力學(xué)變化有關(guān)。因此，進(jìn)一步研究其發(fā)病機(jī)制并尋求有效的防治措施，具有很重要的臨床價值。目前，胸導(dǎo)管淋巴液引流在中重度燒傷、感染中毒性休克及細(xì)菌內(nèi)毒素二重打擊中的作用得到廣泛研究，認(rèn)為其可以作為血液中細(xì)菌、內(nèi)毒素移位的途徑。丹參多酚酸具有抗氧化應(yīng)激、改善微循環(huán)、改善細(xì)胞能量代謝等多種藥理作用，目前多應(yīng)用于治療輕中度腦梗

3、死恢復(fù)期的血管疏通等缺血性心腦血管疾病。
　　本實驗采用經(jīng)胰膽管逆行緩慢注射5％牛磺膽酸鈉造成大鼠SAP模型，并與行頸部胸導(dǎo)管穿刺引流淋巴液及靜脈注射丹參多酚酸之后對比檢測大鼠血清淀粉酶(AMY)、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)等指標(biāo)的變化，胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素含量的變化。旨在揭示SAP并發(fā)腎損傷的機(jī)制，并發(fā)現(xiàn)有效的干預(yù)措施，為今后指導(dǎo)臨床治療提供實驗依據(jù)。
　　方法:
　　健康SD雄性大鼠144只，體重330±3

4、0g，隨機(jī)分成18組，每組8只，包括:頸部假手術(shù)組+腹部假手術(shù)組（J組）2、6、12小時(J2h、6h、12h)組;頸部胸導(dǎo)管引流+腹部假手術(shù)組(Sham組)2、6、12小時(Sham2h、6h、12h)組;頸部假手術(shù)組+SAP組(SAP組)2、6、12小時(SAP2h、6h、12h)組;頸部胸導(dǎo)管引流+SAP組（L組）2、6、12小時(LD2h、6h、12h)組;SAP+丹參多酚酸給藥組（D組）2、6、12小時(D2h、6h、12h)

5、組;頸部胸導(dǎo)管引流+SAP+丹參多酚酸給藥組（LD組）2、6、12小時(LD2h、6h、12h)組;實驗采用以5％?；撬崮懰徕c溶液經(jīng)胰膽管逆行緩慢注射誘導(dǎo)制備SAP模型，并行尾靜脈穿刺進(jìn)行補液，各組按要求行頸部胸導(dǎo)管穿刺置管引流術(shù)及經(jīng)尾靜脈給予緩慢注射丹參多酚酸。按規(guī)定時間點于術(shù)后2、6、12 h進(jìn)行胰腺、腎臟組織大體觀察，測量腹水量，留取血清、血漿樣本及組織標(biāo)本，胸導(dǎo)管引流組按每小時留取淋巴液樣本。肉眼觀察組織大體形態(tài)變化，光鏡下測定

6、胰腺及腎臟的病理評分。檢測血清淀粉酶、肌酐、尿素氮，血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量。
　　結(jié)果:
　　1、J與Sham組相比較腹水量及顏色、胰腺及腎臟病理變化、血清淀粉酶(AMY)、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)，血漿、胰腺及腎組織勻漿中過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量無明顯差異;
　　2、SAP組

7、大鼠與J、Sham組相比，有明顯大量的腹水，顏色暗紅，且隨著時間的延長，腹水量增大，顏色加深;胰腺大體所見有廣泛明顯充血水腫，片狀出血和黑色壞死，6h組及12h組存在散在皂化斑，胰腺病理評分明顯增高(P＜0.01)。腎臟SAP12h組表面暗紅、有腫脹。血清淀粉酶、肌酐、尿素氮含量明顯升高(P＜0.01)，且隨時間延長進(jìn)一步升高;血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　3、D組

8、、L組、LD組分別與J、Sham組相比，腹水量大、顏色暗紅，胰腺病理評分明顯增高(P＜0.01)，腎臟病理損傷明顯加重，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量明顯升高（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時間延長進(jìn)一步升高;血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　4、L組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評分明顯降低(

9、P＜0.01)，腎臟病理損傷減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)含量明顯降低（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時間延長而降低更加明顯(P＜0.05，或P＜0.01);血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　5、D組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評分明顯降低(P＜0.01)，腎臟病理損傷減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)濃

10、度明顯降低（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時間延長而明顯降低;血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01);
　　6、LD組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評分明顯降低(P＜0.01)，腎臟病理損傷顯著減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量顯著降低(P＜0.05，或P＜0.01)，且隨時間延長而降低更明顯;血清過氧化

11、氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　7、LD組與L組、D組各相應(yīng)時間點組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺充血、水腫、出血及壞死情況有所減輕;病理評分降低(P＜0.01)，腎臟腫脹情況減輕，鏡下病理損傷明顯減輕。血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)，明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，血清過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0

12、.01)。
　　結(jié)論:
　　1.SAP時腎臟出現(xiàn)腎實質(zhì)廣泛出血，腎小管上皮細(xì)胞變性壞死，腎間質(zhì)淤血、炎細(xì)胞浸潤，腎小管狹窄、堵塞等病理改變， AMY、CR、BUN水平明顯升高，血漿、腎組織勻漿中CAT和GSH-PX水平明顯降低，說明SAP時引起了腎損傷性變化，腎功能受到影響。
　　2.SAP并發(fā)腎損傷時，胸導(dǎo)管淋巴液中的內(nèi)毒素濃度含量較正常有明顯升高，血液中內(nèi)毒素濃度水平也明顯升高，提示其與SAP并發(fā)腎損傷密切相關(guān)。<

13、br>　　3.在SAP伴AKI時，血清、淋巴液、胰腺及腎組織勻漿中CAT、GSH-PX缺乏，說明機(jī)體抗氧化能力下降。
　　4.行胸導(dǎo)管淋巴液引流后，腎臟病理損傷改變較SAP組明顯減輕，AMY、CR、BUN水平明顯降低，CAT和GSH-PX水平明顯升高，血液中內(nèi)毒素的含量明顯降低，說明胸導(dǎo)管引流對腎臟起到保護(hù)作用。
　　5.應(yīng)用丹參多酚酸能通過改善全身微循環(huán)、清除氧自由基等作用減輕SAP時腎的損害程度。
　　6.胸導(dǎo)管引