PGC-1α去乙?；贛PP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞氧化損傷的影響.pdf

1、【背景】
　　過氧化物酶增殖物激活受體γ(PPARγ)輔激活因子1α(PGC-1α)可強(qiáng)有力調(diào)控氧化和抗氧化過程,在線粒體生物學(xué)過程和氧化應(yīng)激中具有突出的作用,其廣泛參與各種新陳代謝通路的調(diào)節(jié),如能量代謝、線粒體生物合成、糖脂代謝等。PGC-1α轉(zhuǎn)錄活性受內(nèi)源性去乙酰化酶SIRT1調(diào)節(jié)。SIRT1在MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷中作用機(jī)制未見報(bào)道,在氧化應(yīng)激時(shí)是否起到上調(diào)和維持PGC-1α的積極作用也未見報(bào)道。

2、>　　【目的】
　　1、探討SIRT1對(duì)PGC-1α去乙?；挠绊?。
　　2、明確去乙?；瘜?duì)PGC-1α在MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)作用的影響,并尋找其中的重要分子機(jī)制。
　　【方法】
　　1、細(xì)胞免疫組化檢測TH。
　　2、MTT法檢測細(xì)胞活力,觀察不同濃度MPP+、SRT1720、EX527干預(yù)SH-SY5Y細(xì)胞24h后的細(xì)胞活力變化。
　　3、使用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測SH-SY5Y細(xì)胞胞內(nèi)R

3、OS水平。
　　4、Western-Blot免疫印跡法檢測SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)SIRT1、PGC-1α蛋白表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　　1、MTT法檢測發(fā)現(xiàn)不同濃度MPP+處理SH-SY5Y細(xì)胞后存活率明顯下降,有一定的濃度依賴性。SIRT1誘導(dǎo)劑SRT1720、EX527在一定濃度范圍內(nèi)干預(yù)處理后,細(xì)胞存活率與對(duì)照組比較無明顯變化。
　　2、SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)ROS的檢測,顯示SRT1720與EX527均能抑制M

4、PP+誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生。
　　3、Western-Blot免疫印跡法結(jié)果示:MPP+處理細(xì)胞后SIRT1、PGC-1α蛋白表達(dá)水平下降(P<0.05);經(jīng)EX527預(yù)處理后,細(xì)胞內(nèi)SIRT1、PGC-1α蛋白水平升高。經(jīng)SRT1720預(yù)處理后,細(xì)胞內(nèi)SIRT1、PGC-1α蛋白水平無明顯改變。
　　【結(jié)論】
　　1、在MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞PD模型中,EX527不是SIRT1的抑制劑,相反能增加SIRT1的活性