人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的微囊通過(guò)誘導(dǎo)HGF促進(jìn)人腎癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移侵襲能力.pdf

1、目的：
　　初步探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的微囊（hWJMSC-MVs）對(duì)人腎癌細(xì)胞(RCC）的影響及其可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　　1、選用人腎癌細(xì)胞株786-O作為研究對(duì)象，分三組進(jìn)行干預(yù)：
　?。?）+MVs組，（2）control組，（3）+RNase-MV組（經(jīng)RNA酶處理的MV），24h、48h后檢測(cè)腫瘤細(xì)胞增殖率（CCK-8）及細(xì)胞周期，進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)腎癌細(xì)胞中MMP-

2、2、MMP-9基因的表達(dá)情況。
　　2、裸鼠皮下注射腎癌細(xì)胞建立腎癌移植瘤模型，每三天測(cè)量一次腫瘤大小，計(jì)算各組腫瘤面積及發(fā)生率，36d后進(jìn)行犧牲，分別進(jìn)行免疫組化分析（HGF、KI-67及Tunel）。
　　3、運(yùn)用Western blot技術(shù)檢測(cè)各組腎癌標(biāo)本中MMP-2、MMP-9、cyclinD1的蛋白表達(dá)情況。然后檢測(cè)各組腎癌細(xì)胞或腫瘤標(biāo)本中HGF、c-MET、ERK1/2、AKT蛋白表達(dá)情況，并對(duì)c-MET抑制劑干

3、預(yù)后的腎癌細(xì)胞中p-ERK1/2、p-AKT蛋白表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)論：
　　hWJMSC-MVs促進(jìn)了腎癌的生長(zhǎng)及侵襲能力，其作用機(jī)制可能是MVs誘導(dǎo)HGF的增加從而增強(qiáng)了PI3k-AKT及Ras/MAPK（ERK1/2）信號(hào)通路的活化，進(jìn)一步加強(qiáng)了腎癌細(xì)胞增殖及抗凋亡的能力。同時(shí)發(fā)現(xiàn)MV經(jīng)RNA酶處理后喪失了進(jìn)一步促進(jìn)腎癌生長(zhǎng)的能力，證明MVs對(duì)靶細(xì)胞的作用可能是通過(guò)傳遞有效的遺傳物質(zhì)（mRNA/miRNA）來(lái)實(shí)現(xiàn)