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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究首先建立了反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測(cè)定中華絨螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢組織內(nèi)的恩諾沙星、環(huán)丙沙星含量。流動(dòng)相及色譜條件為:流動(dòng)相:甲醇/(0.05mol/L檸檬酸+0.01mol/L醋酸銨,三乙胺調(diào)pH4.5)=25/75(VN)。色譜條件:RP-ODSC18分析柱(150mm×4.6mm,5μm);檢測(cè)波長(zhǎng):276nm;流速:1.5mL/min;柱溫:40℃;自動(dòng)進(jìn)樣量:10μL。結(jié)果表明,恩諾沙星和環(huán)丙沙
2、星在五種組織中的平均回收率分別為74.8%±15.61%,75.02%±14.73%;日內(nèi)精密度分別為3.26%±0.84%,2.51%±0.68%;日間精密度分別為4.86%±2.46%,3.38%±1.16%。恩諾沙星、環(huán)丙沙星的最低檢測(cè)量分別為0.02μg/g和0.004μg/g。本方法快速、靈敏、準(zhǔn)確,適合于中華絨螯蟹各組織中恩諾沙星、環(huán)丙沙星含量分析。 第二部分研究了不同水溫(16℃、25℃)、不同給藥劑量(10mg/
3、kg、20mg/kg)和不同給藥方式(肌注、口灌)等條件下,恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星在中華絨螯蟹體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué),全面比較了不同條件下藥物在蟹血淋巴中的吸收、分布和代謝的差異。結(jié)果表明,在本試驗(yàn)條件下,肌注給藥后恩諾沙星在蟹血淋巴中的藥—時(shí)數(shù)據(jù)均符合開放式一級(jí)吸收二室模型。其藥動(dòng)學(xué)方程分別為:Ct=4.426e-1536t+2.62e-0.027t(組Ⅰ);Ct=6.609e-1.194t+1.334e-0.008t(組Ⅱ);Ct=
4、6.416e-0.132t+0.991e-0.008t(組Ⅲ)。而口灌給藥(組Ⅳ)后恩諾沙星在蟹血淋巴中的藥—時(shí)數(shù)據(jù)卻不能用房室模型擬合。組Ⅰ的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為:AUC96.818mg/L·h,Cmax6.54μg/mL,t1/2α0.851h,t1/2β95.415h;組Ⅱ的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為:AUC168.457mg/L·h,Cmax7.12μg/mL,t1/2α0.58h,t1/2β88.833h;組Ⅲ的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為
5、:AUC155.612mg/L·h,Cmax11.045μg/mL,t1/2α5.239h,t1/2β88.378h;組Ⅳ的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為:AUC86.525mg/L·h,Cmax3.469μg/mL,t1/2α8.071h,t1/2β61.842h。不同給藥方式間主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)差異較大。恩諾沙星只有少量代謝為環(huán)丙沙星,各取樣時(shí)間點(diǎn)血淋巴中的環(huán)丙沙星濃度均處較低值。組Ⅰ~Ⅳ中,代謝產(chǎn)物的生成率分別為5.45%、1.38%、6.
6、19%和4.44%,其中肌注給藥組的平均代謝率為4.34%,且藥—時(shí)數(shù)據(jù)不能用房室模型擬合。 第三部分研究了10mg/kgb.w.劑量肌注和口灌給藥后,恩諾沙星及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星在中華絨螯蟹體內(nèi)的代謝和消除規(guī)律,并初步探討了恩諾沙星的療效和給藥方案。用梯形法計(jì)算了主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù),肌注給藥后肝胰腺和肌肉中恩諾沙星的曲線下面積(AUC)分別為251.179和117.08μg·h/g,總體清除率(CLs)分別為0.076mg/kg·
7、h和0.036mg/kg·h,消除半衰期分別為73.93和45.186h;口灌給藥后肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢中恩諾沙星AUC分別為126.502、218.207、91.857和100.524μg·h/g,總體清除率分別為0.07mg/kg·h、0.026、0.091和0.095mg/kg·h。數(shù)據(jù)分析表明,肌注給藥后,肝胰腺中的藥物濃度/血淋巴藥物濃度要大于口灌給藥組,提示血淋巴中藥物大量向肝胰腺單向轉(zhuǎn)移,而口灌給藥后藥物在首先到達(dá)肝胰
8、腺后即迅速通過(guò)血淋巴向組織中轉(zhuǎn)移。口灌給藥后,蟹精巢和卵巢中藥物濃度基本都低于血淋巴。總的來(lái)說(shuō),各組織間藥物濃度差異不顯著,這說(shuō)明無(wú)論肌注還是口灌給藥后,恩諾沙星在蟹各組織沒有出現(xiàn)大量“沉積”的現(xiàn)象,相對(duì)而言,肝胰腺中的藥物濃度最高。給藥15d后,只有肝胰腺中藥物濃度在最高殘留限量附近,其它各組織中均不能檢出恩諾沙星。代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星的量也極低,幾乎所有各組織中藥物濃度均低于最高殘留限量,給藥后第15d即不能檢出環(huán)丙沙星。療效研究表明,
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