液相微萃取在中藥呋喃香豆素成分分析及藥物蛋白結(jié)合參數(shù)測定中的應(yīng)用.pdf

1、本文對液相微萃取在中藥呋喃香豆素成分分析及藥物蛋白結(jié)合參數(shù)測定中的應(yīng)用進行了研究。文章分為兩個部分：
　　 第一部分：中空纖維液相微萃取和分散液相微萃取在4種呋喃香豆素成分分析中的應(yīng)用及比較。
　　 目的：以4種呋喃香豆素化合物為萃取對象，探討中空纖維液相微萃取(HFLPME)和分散液相微萃取(DLLME)兩種樣品前處理方法的萃取機理；并與高效液相色譜(HPLC)結(jié)合對兩種萃取方式進行可行性比較。
　　 方法：對

2、HFLPME和DLLME實驗條件包括中空纖維種類、萃取溶劑、溶劑體積、萃取時間、攪拌速度等進行優(yōu)化，比較二者的萃取效果和萃取時間、凈化、準(zhǔn)確度和可操控性等。
　　 結(jié)果：在優(yōu)化的實驗條件下，用HFLPME/HPLC和DLLME/HPLC對4種呋喃香豆素化合物(補骨脂素、氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素)進行測定。富集倍數(shù)分別在12.2-18.5倍和11.6-21.6倍，檢測限分別在1.2-5.0μg/L和1.0-3.0μg/L，

3、RSD均小于6.2％。兩種方法對4種呋喃香豆素化合物的萃取效果沒有顯著的不同。
　　 結(jié)論：兩種萃取方式的富集倍數(shù)、準(zhǔn)確度和精密度均好，對弱極性化合物有良好的萃取效率等。兩種萃取方式的不同在于HFLPME容易操作，比較穩(wěn)定；DLLME耗時較短，無需專門的萃取材料；與HFLPME相比，DLLME萃取時間極短，適用于實驗室中批處理樣品；而HFLPME由于中空纖維的化學(xué)結(jié)構(gòu)對化合物的選擇性，使HFLPME對復(fù)雜基質(zhì)樣品的凈化能力強；測

4、定補骨脂素和氧化前胡素的線性范圍較DLLME寬，而異歐前胡素的線性范圍較之窄；HFLPME和DLLME分析中藥中4種化合物的平均回收率分別在90.8％-106.5％和97.2.1％-106.1％；兩種萃取方法獲得較高的富集倍數(shù)，檢測出了中藥白芷及其制劑中微量成分補骨脂素。
　　 第二部分：中空纖維液相微萃取在中藥呋喃香豆素類藥物蛋白結(jié)合參數(shù)測定中的應(yīng)用。
　　 目的：建立中空纖維液相微萃取(HFLPME)-高效液相色譜法

5、(HPLC)測定中藥中4種呋喃香豆素類化合物(補骨脂素、氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素)在牛血清白蛋白(BSA)中的總濃度及游離藥物濃度的測定方法，分別計算出了4種成分與BSA的結(jié)合率，并利用Klotz方程計算出各自的結(jié)合參數(shù)。
　　 方法：利用中空纖維液相微萃取裝置，分別取作為供相的樣品溶液(蛋白溶液與空白溶液)于2 mL的玻璃管中，將注滿接受相(正庚醇)的中空纖維管放置于樣品溶液中，在轉(zhuǎn)速1800 rpm下萃取60 min

6、，收集接受相，高效液相色譜儀分析。
　　 結(jié)果：利用中空纖維液相微萃取法直接測定4種藥物的蛋白結(jié)合率，結(jié)果表明兩種或以上藥物與蛋白作用時，相互之間的蛋白結(jié)合率沒有影響。補骨脂素、氧化前胡素、歐前胡素、異歐前胡素與蛋白的結(jié)合率分別為58％-62％，18％-21％，27％-33％和40％-48％，結(jié)果表明補骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素三者的蛋白結(jié)合率均較高，而氧化前胡素的蛋白結(jié)合率較低。4種藥物成分與BSA的結(jié)合常數(shù)分別為1801、