依達拉奉對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的:觀察不同劑量依達拉奉預處理和后處理聯(lián)合對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響,并探討其機制。
　　 方法:隨機將40只雄性Wistar大鼠分為5組(n=8),假手術(shù)組(S組),缺血再灌注組(Ⅰ組),依達拉奉治療組1mg/kg(E1組),依達拉奉治療組3mg/kg(E3組),依達拉奉治療組5mg/kg(E5組)。腹腔注射10％水合氯醛3ml/kg麻醉后,制備腎臟缺血再灌注損傷模型。開腹后,用無損傷動脈夾同時夾閉雙側(cè)腎蒂,開始計時,肉眼

2、觀察腎臟顏色變?yōu)榘导t色即可確認腎臟血流阻斷,造成雙側(cè)腎缺血,缺血模型成功。雙側(cè)腎缺血45min后,松開動脈夾,腎臟由暗紅色恢復鮮紅色即可確認血流恢復,夾閉和開放腎蒂時腹腔內(nèi)保留林格液20ml/kg。S組僅行開腹,游離出雙側(cè)腎臟,分離雙側(cè)腎蒂不夾閉,傷口用生理鹽水紗布覆蓋,暴露45min不作腎缺血處理;Ⅰ組夾閉雙側(cè)腎蒂,缺血45min后松開動脈夾;E1組缺血前和再灌注即刻經(jīng)尾靜脈注入依達拉奉總量1mg/kg;E3組缺血前和再灌注即刻經(jīng)尾靜

3、脈注入依達拉奉總量3mg/kg;E5組缺血前和再灌注即刻經(jīng)尾靜脈注入依達拉奉總量5mg/kg。再灌注6h,麻醉后迅速經(jīng)心臟取血和切取腎標本,待測。酶法測定血清肌酐(Cr)水平、苦味酸不除蛋白法測定尿素氮(BUN)水平;硫代巴比妥酸法(TBA)測定腎組織丙二醛(MDA)含量、黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用免疫組化(SP)法觀察腎組織中凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表達,計算蛋白陽性染色指數(shù)(positive index

4、,PI);原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標記(TUNEL)法測定腎組織中凋亡細胞,計算凋亡指數(shù)(AI):蘇木精-伊紅(HE)染色,在光鏡下觀察腎組織病理學變化。
　　 結(jié)果:與S組比較,缺血再灌注6h時Ⅰ組、E1組、E3組、E5組的BUN、Cr升高,MDA升高,SOD降低(P＜0.05);與Ⅰ組比較,E1組、E3組、E5組的BUN、Cr降低,MDA降低,SOD升高(P＜0.05);與E1組比較,E3組、E5組的BUN、Cr降低,MDA

5、降低,SOD升高(P＜0.05);與E3組比較,E5組的BUN、Cr、MDA、SOD值差異無統(tǒng)計學意義.與S組比較,缺血再灌注6h時Ⅰ組、E1組、E3組、E5組Bcl-2蛋白PI值降低,Bax蛋白PI值升高,AI值升高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),病理學損傷明顯;與Ⅰ組比較,E1組、E3組、E5組Bcl-2蛋白PI值升高,Bax蛋白PI值降低,AI值降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),光鏡下可見腎組織損傷明顯減輕;與E1組比較

6、,E3組、E5組Bcl-2蛋白PI值升高,Bax蛋白PI值降低,AI值降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),光鏡下腎組織損傷有所減輕;與E3組比較,E5組Bcl-2蛋白PI值、Bax蛋白PI值、AI值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:1不同劑量的依達拉奉預處理和后處理聯(lián)合可以減輕腎缺血再灌注損傷,對腎臟都有保護作用,在1-3mg/kg范圍內(nèi),隨著依達拉奉劑量增大其對腎臟的保護作用增強,當?shù)竭_5mg/kg,其保護作