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文檔簡介
1、瘧疾是全球關(guān)注、高發(fā)的感染性疾病,對人類的生命安全造成了嚴(yán)重的威脅,闡明宿主抵抗瘧原蟲感染的保護(hù)性免疫應(yīng)答的發(fā)生機制,研制行之有效的瘧疾疫苗,尋找具有良好作用的抗瘧藥物和抗瘧藥物輔助劑是目前控制瘧原蟲感染和再感染急需解決的問題。胸腺素α原(prothymosinα,ProTα)具有廣泛的生物學(xué)活性,參與對細(xì)胞周期的調(diào)節(jié),促進(jìn)細(xì)胞增殖,還可以提高免疫細(xì)胞活性和增強免疫細(xì)胞因子分泌,增強樹突狀細(xì)胞的活性,對于抗原的呈遞具有重要作用,有望成為
2、一種很好的候選免疫佐劑和抗瘧輔助藥物。
本實驗研究了約氏瘧原蟲致死性蟲株P(guān).yoelii-17XL、非致死性蟲株P(guān).yoelii-17XNL與重組人ProTα之間的關(guān)系。實驗證明感染了P.yoelii-17XL的小鼠肝臟細(xì)胞中有大量ProTα高表達(dá)。通過內(nèi)臟器官指數(shù)測定和病理學(xué)切片發(fā)現(xiàn),感染了兩株瘧原蟲的小鼠肝臟、脾臟、胸腺均受到了明顯的損傷。采用感染P.yoelii-17XNL的小鼠血清通過皮下注射的方式注射到感染了P.
3、yoelii-17XL的小鼠體內(nèi),可以使這些小鼠的瘧原蟲血癥水平下降,并提高小鼠的存活率(提高了25%)。該結(jié)果提示經(jīng)P.yoelii-17XNL感染的小鼠血清中含有效抵抗瘧疾感染的特異性抗體存在。
采用超聲破碎法提取了紅內(nèi)期P.yoelii-17XNL和P.yoelii-17XL的全蟲可溶性蛋白作為抗原開展保護(hù)小鼠抵抗P.yoelii-17XL感染的研究。應(yīng)用感染了瘧原蟲后存活下來的抗血清作為抗體,對兩種抗原進(jìn)行West
4、ern-blotting免疫印跡實驗,結(jié)果顯示在19KD、23KD、33KD和48KD等處有明顯的雜交條帶,這些蛋白與文獻(xiàn)報道的裂殖子表面蛋白分子量接近。從另一方面證明這些抗原是具有誘導(dǎo)機體產(chǎn)生有效抗體的抗原成分。
應(yīng)用P.yoelii-17XNL全蟲可溶性蛋白作為抗原,ProTα作為免疫佐劑進(jìn)行保護(hù)性實驗,經(jīng)過抗原和佐劑免疫小鼠后,再感染P.yoelii-17XL。結(jié)果表明免疫過的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能增強;用P.yo
5、elii-17XNL全蟲可溶性蛋白作為抗原、用ProTα作為佐劑免疫的小鼠抵抗瘧原蟲感染的保護(hù)效果要比單獨使用P.yoelii-17XNL全蛋白免疫效果好,提示了ProTα在作為瘧疾疫苗佐劑方面的潛在作用。
通過單獨腹腔注射ProTα的實驗結(jié)果表明,提前腹腔注射ProTα一段時間,再感染P.yoelii-17XL,可以大大降低小鼠的瘧原蟲血癥水平,提高小鼠的存活率,表明單獨使用ProTα就能夠有效達(dá)到抵抗瘧原蟲感染的效果。
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