約氏瘧原蟲感染TLR2-TLR7活化效應特點的研究.pdf

1、目的:瘧原蟲為單細胞寄生生物。當瘧原蟲感染宿主時，TLRs可識別瘧原蟲的病原相關(guān)的模式分子(PAMP)，將把病原入侵的信息傳遞給機體，激活免疫系統(tǒng)發(fā)揮抵抗感染作用，是機體抵御感染性病的第一道保護屏障。研究表明，TLR2在瘧疾感染過程中，它能識別瘧原蟲的磷脂酰肌醇(PI)，主要表達于髓樣樹突狀細胞(mDC)。TLR7具體識別瘧原RNA，主要表達在漿樣樹突狀細胞(pDC)，TLR7被其配體激活后，通過下游接頭蛋白分子MyD88將激活信號向下

2、游傳遞，最終激活轉(zhuǎn)錄因子NF-κ B，從而產(chǎn)生多種促炎性細胞分化，參加體液免疫或細胞免疫應答。TLR2、TLR7其激活能夠活化樹突狀細胞(Dendritic Cells，DC)，上調(diào)細胞表面分子如共刺激分子和MHCⅡ類分子的表達，同時抑制DC的凋亡?！禢ature》刊發(fā)的文章已明確證實，DC實現(xiàn)對T細胞的激活效應主要取決于TLRs的存在，DC正是決定Th細胞應答形式、強度和效應的關(guān)鍵因素，TH1、TH2、TFH細胞能有效遏制寄生蟲感染，

3、它們分別在瘧疾感染不同階段發(fā)揮效應，其中感染早期建立的TH1型細胞免疫應答可顯著提高吞噬細胞的吞噬能力和殺傷活性，進而控制病原蟲的指數(shù)性增殖，隨后，TFH、TH2細胞不僅輔助B細胞活化、成熟增殖并產(chǎn)生特異性抗體可有效滅除病原體，還可促進B細胞分化為記憶B細胞(Bm)。本研究通過創(chuàng)建約氏瘧原蟲Plasmodiumyoelii感染BALB/c小鼠模型，觀察瘧疾感染早期CD4+T細胞及其亞群的活化狀況、應答模式以及感染后期抗體的分泌水平以及記

4、憶性T、B細胞的增殖情況，明確TLRs介導DC調(diào)控免疫記憶建立和維持的作用機制，以期為研制開發(fā)有效的瘧疾疫苗提供新的靶點和思路。
　　研究方法:創(chuàng)建約氏瘧原蟲Plasmodiumyoelii感染BALB/c小鼠的模型，通過流式細胞術(shù)、real-time PCR、Elisa方法觀察瘧疾感染早期CD4+T細胞及其亞群的活化狀態(tài)、應答模式以及感染后期抗體的分泌水平及記憶性T、B細胞的增殖情況，明確TLRs介導DC調(diào)控免疫效應的維持和建立

5、的作用及其原理。
　　結(jié)果:1、在P.y17XNL感染BALB/c小鼠模型中，TLR2激動劑Pam3CSK4可通過活化DC增強感染早期TH1、TFH型保護性免疫效應，從而使感染小鼠原蟲血癥水平降低，而未活化TH2型及調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)引起的免疫應答。在感染10天后，可以促進記憶性T細胞、記憶B細胞的增殖，但與對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異。2、在P.y17XNL感染BALB/c小鼠模型中，TLR7激動劑Loxorbine可通過活

6、化DC增強感染早期TH1、TH2、TFH型保護性免疫應答，從而使感染小鼠原蟲血癥水平降低，而對Treg細胞數(shù)量影響不大。在感染10天后，可以促進記憶性T細胞、記憶B細胞的增殖，但與對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)論:在P.y17XNL感染BALB/c小鼠模型中，TLR2激動劑Pam3CSK4、TLR7激動劑Loxorbine可通過誘導DC活化，促進有效的TH1、TFH免疫效應，在感染早期發(fā)揮保護性免疫作用，并降低原蟲血癥水平。