約氏瘧原蟲感染活化STAT1和STAT3及抑制肺癌生長.pdf

1、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子1(STAT1)和3(STAT3)是重要的細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白。它們經(jīng)磷酸化活化后(pSTAT1和pSTAT3)，對調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能起到十分關(guān)鍵的作用。并且腫瘤免疫學(xué)已經(jīng)廣泛研究了pSTAT1/pSTAT3平衡的作用。本研究首次探討了C57BL/6小鼠分別感染約氏瘧原蟲致死株(Py17XL)和非致死株(Py17XNL)后pSTAT1/pSTAT3平衡的變化情況。用western-blot的方法檢測肝臟、脾臟、淋巴結(jié)

2、、腹腔巨噬細(xì)胞的STAT1/STAT3和pSTAT1/pSTAT3的變化情況。結(jié)果顯示：兩蟲株在接種后第一天均能迅速誘導(dǎo)STAT1和STAT3活化并達(dá)到峰值；隨后pSTAT1和pSTAT3的水平均下降但是仍高于對照組；而在Py17XNL感染兩周后，pSTAT3的水平出現(xiàn)反彈而升高。利用光密度分析western-blot的結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在Py17XNL感染的早期，pSTAT1在pSTAT1/pSTAT3平衡中一直占據(jù)主導(dǎo)地位，而隨著寄生蟲血癥

3、高峰的到來，該平衡過渡到pSTAT3占據(jù)主導(dǎo)地位直至寄生蟲血癥完全消失：但是在Py17XL感染過程中，pSTAT3在pSTAT1/pSTAT3平衡中一直占據(jù)主導(dǎo)地位，并伴隨極高的寄生蟲血癥而導(dǎo)致小鼠全部死亡。 由于全球瘧疾發(fā)病率和肺癌發(fā)病率呈反變消長關(guān)系，再加上約氏瘧原蟲非致死株感染能夠活化機(jī)體的免疫反應(yīng)，推測瘧原蟲感染有可能增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫、逆轉(zhuǎn)肺癌的免疫逃逸，從而抑制肺癌的發(fā)生或生長。為研究Py17XNL感染對lewis

4、肺癌生長的影響，C57BL/6小鼠皮下接種Lewis肺癌細(xì)胞(LLC)后第十天經(jīng)腹腔注射Py17XNL感染的紅細(xì)胞，從感染的第1天起測量腫瘤體積大小，并且取不同感染時(shí)間的小鼠，用流式細(xì)胞儀檢測各組小鼠脾細(xì)胞的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的含量，檢測經(jīng)LLC全蛋白刺激后的脾細(xì)胞內(nèi)CD8+T細(xì)胞分泌的IFN-γ水平：用western-blot方法檢測腫瘤組織內(nèi)的STAT1/STAT3和pSTAT1/pSTAT3的變化情況，并利用光密度分析pST

5、AT1/pSTAT3比值在腫瘤瘧疾組和腫瘤組的差異。結(jié)果表明Py17XNL感染明顯抑制小鼠肺癌的生長，而且肺癌荷瘤小鼠從感染瘧疾的第三天起，其脾臟內(nèi)的Treg含量明顯低于單純腫瘤組；從感染的第5天起，腫瘤瘧疾組中的經(jīng)LLC全蛋白刺激的脾細(xì)胞中分泌IFN-γ的CD8+T細(xì)胞開始遠(yuǎn)高于單純腫瘤組；從感染的第14天起，腫瘤瘧疾組腫瘤組織的pSTAT1水平開始高于單純腫瘤組，而在感染后第21天腫瘤瘧疾組的腫瘤組織pSTAT3水平開始低于單純腫瘤

6、組。從感染瘧原蟲的第14天起，腫瘤瘧疾組腫瘤組織pSTAT1/pSTAT3的比值高于單純腫瘤組中的比值，并且這種差異具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 可以得出結(jié)論：約氏瘧原蟲致死株和非致死株感染均能引起STAT1和STAT3活化，并在感染的第一天達(dá)到峰值；但是約氏瘧原蟲致死株和非致死株感染所引起的pSTAT1和pSTAT3的平衡模式完全不同。約氏瘧原蟲非致死株感染通過下調(diào)Treg水平、增強(qiáng)針對腫瘤的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL)反應(yīng)、提高腫瘤