三種形式自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗塞的實驗研究.pdf

1、目的：探討兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)移植于缺血心肌后的增殖分化情況和對缺血心肌細(xì)胞的修復(fù)重建能力及心功能改善情況，比較三種體外不同處理方式的MSC自體移植治療梗死后心臟的效果，尋找在體外處理種子細(xì)胞的最佳方式。 方法：采用結(jié)扎冠狀動脈左前降支的方法建立心肌梗死模型，模型成功建立的新西蘭白兔40只隨機(jī)分為4組，2周后分別將自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs組n=10)、經(jīng)5-aza誘導(dǎo)24小時的MSCs(誘導(dǎo)組n=10)、新鮮分離

2、的骨髓單個核細(xì)胞(BMMNs組n=10)，Dil標(biāo)記后用微量注射器注射于兔缺血心肌內(nèi)，并以無血清培養(yǎng)基注射動物為對照組(CON組n=10)。分別在造模前、造模后、細(xì)胞移植后2周、4周二維超聲心動測量LVESD、LVEDD，計算LVEF、FS，應(yīng)用多譜勒獲取主、肺動脈以及二、三尖瓣瓣口血流頻譜速度；組織多譜勒(DopplerTissueImaging，DTI)測量二尖瓣環(huán)運(yùn)動速度等指標(biāo)評價心功能；同時利用心肌聲學(xué)造影(Myocardial

3、ContrastEchocardiography,MCE)評價缺血區(qū)的血流灌注情況。細(xì)胞移植后8周處死所有實驗動物，流式細(xì)胞儀及病理學(xué)檢測移植細(xì)胞在梗死區(qū)的生長和毛細(xì)血管生長狀況。 結(jié)果：細(xì)胞移植術(shù)后8周，所有細(xì)胞移植組均見Dil陽性的移植細(xì)胞存活并表達(dá)α-橫紋肌肌動蛋白和結(jié)蛋白，誘導(dǎo)組Dil陽性細(xì)胞出現(xiàn)類似肌小節(jié)樣結(jié)構(gòu)，各細(xì)胞移植組毛細(xì)血管密度均較對照組顯著增多，心肌聲學(xué)造影亦見細(xì)胞移植后顯著改善梗死區(qū)血流灌注。M型超聲心動檢

4、查發(fā)現(xiàn)：細(xì)胞移植后2周、4周均見MSCs組和誘導(dǎo)組LVEF、FS值比對照組顯著升高(p＜0.05)，而BMMNCs組僅在移植后4周明顯改善(p＜0.05)；LVESD、LVEDD細(xì)胞移植組與對照組相比無顯著差異；組織多譜勒僅見誘導(dǎo)組細(xì)胞移植后2周二尖瓣環(huán)收縮期運(yùn)動速度比對照組顯著提高(p＜0.05)，主、肺動脈以及二、三尖瓣瓣口血流頻譜速度各組無顯著差異。 結(jié)論：體外培養(yǎng)純化后的MSCs、5-aza誘導(dǎo)24小時的MSCs以及新鮮