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1、本文旨在構(gòu)建pSecTag-OPG真核分泌表達(dá)穿梭載體,培養(yǎng)骨保護(hù)素(OPG)基因修飾的Cos-7細(xì)胞系并檢測(cè)其表達(dá)能力,為基因工程技術(shù)治療牙周病提供基礎(chǔ)。 本研究根據(jù)編碼OPG功能蛋白基因序列,設(shè)計(jì)并合成了特異性寡聚核苷酸引物,提取293細(xì)胞的總mRNA,以O(shè)PG基因RT產(chǎn)物eDNA為模板,采用DNA聚合酶PCR擴(kuò)增,克隆具有抑制破骨細(xì)胞功能的OPG基因DNA,并將其重組到載體pSecTag2/B中測(cè)序;重組質(zhì)粒經(jīng)PCR、Hi
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