子宮平滑肌腫瘤的鑒別診斷及雙向電泳分析.pdf

1、第一部分子宮平滑肌腫瘤的鑒別診斷.一、子宮平滑肌肉瘤與特殊類型良性平滑肌瘤的鑒別.目的:探討鑒別子宮平滑肌肉瘤(LMS)和特殊類型良性平滑肌瘤的高度敏感和特異的免疫組化指標(biāo).方法:選取甲醛固定石蠟包埋的子宮平滑肌腫瘤82例,其中子宮平滑肌肉瘤17例,富于細(xì)胞型平滑肌瘤25例,奇異型平滑肌瘤15例,普通型平滑肌瘤25例,用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法(SP法)檢測(cè)各組織中結(jié)蛋白、α平滑肌特異性肌動(dòng)蛋白(SMA)、調(diào)寧蛋白(ca

2、lponin h1)、重型鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白(h-caldesmon)、雌激素及孕激素受體、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、肥大細(xì)胞和CD44v3的表達(dá).結(jié)論:在鑒別子宮特殊類型平滑肌瘤和平滑肌肉瘤時(shí),由于核分裂數(shù)易受多方面因素的影響而造成較大的變化,因此綜合雌、孕激素受體的表達(dá)、增殖細(xì)胞核抗原指數(shù)和肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)可用來(lái)輔助鑒別診斷,其中肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)用來(lái)鑒別診斷子宮LMS的靈敏度和特異度均較高.目的:子宮富于細(xì)胞平滑肌瘤和子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤之間存

3、在形態(tài)學(xué)和免疫組化指標(biāo)表達(dá)上的交叉,有時(shí)較難正確鑒別診斷.該研究旨在評(píng)價(jià)一系列免疫組化指標(biāo)在鑒別兩者中的意義.方法:選取子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤26例(低度惡性21例,高度惡性5例),子宮富于細(xì)胞平滑肌瘤25例.另外,取正常子宮肌層和正常子宮內(nèi)膜各25例.采用常規(guī)免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法(SP法)檢測(cè)各組織中結(jié)蛋白、α平滑肌特異性肌動(dòng)蛋白、調(diào)寧蛋白、重型鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白、雌激素及孕激素受體、CD10和CD44v3、增殖細(xì)胞核抗原

4、(PCNA)和肥大細(xì)胞的表達(dá).結(jié)論:在大多數(shù)情況下,結(jié)合重型鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白、CD10和CD44v3的表達(dá)可鑒別子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤和富于細(xì)胞平滑肌瘤.腫瘤內(nèi)的肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)也可以輔助鑒別診斷,但肥大細(xì)胞在這些腫瘤中的生物學(xué)作用尚待進(jìn)一步研究.第二部分子宮肌瘤蛋白質(zhì)組的雙向電泳分析.目的:建立并優(yōu)化用于子宮肌瘤蛋白質(zhì)組分析的雙向電泳技術(shù),比較子宮肌瘤和正常肌層蛋白表達(dá)譜的差異.方法:以固相pH梯度等電聚焦為第一向,采用垂直十二烷基磺酸鈉-聚丙

5、烯酰胺凝膠電泳為第二向進(jìn)行雙向電泳,對(duì)關(guān)鍵步驟如樣品的溶解、上樣量、電泳參數(shù)和染色方法進(jìn)行一系列的優(yōu)化.同時(shí)結(jié)合計(jì)算機(jī)輔助的圖像分析技術(shù),比較子宮肌瘤和正常肌層蛋白質(zhì)組的表達(dá)差異.結(jié)論:①采用蛋白溶解度增強(qiáng)的裂解液分步提取組織的蛋白質(zhì),有利于雙向電泳圖譜的完整性.②RC DC蛋白定量方法是雙向電泳較為理想的蛋白定量方法,直接關(guān)系到上樣量.③質(zhì)譜兼容銀染法并不降低蛋白斑點(diǎn)的分辨率.④窄范圍(pH4~7)的固相pH梯度膠條較寬范圍(pH3~