茶多酚對(duì)小鼠細(xì)胞色素P450和b-,5-含量及CYP2E1和CYP1A2表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 研究短期內(nèi)應(yīng)用茶多酚(tea polyphenols，TPs)對(duì)小鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)和b5含量及CYP2E1和CYP1A2表達(dá)的影響。 方法： 1．測定CYP450和b5含量：雄性小鼠分別按小劑量(25mg/kg·d-)、中劑量(50 mg/kg·d-)和高劑量(100 mg/kg·d-)TPs腹腔注射給藥兩天。氯霉素為陽性對(duì)照組，在取肝前1小時(shí)以50mg/kg·d-腹腔注射給藥；陰性對(duì)照

2、組給等量生理鹽水，在第三天所有小鼠斷頭處死取肝，制備肝微粒體，用紫外分光光度計(jì)測定小鼠肝臟CYP450和b5含量。 2．TPs對(duì)撲熱息痛所致小鼠死亡率的影響：雄性小鼠分別按100 mg/kg·d、200 mg/kg·d-和400 mg/kg·d-TPs灌胃給藥6天。陽性對(duì)照組給予900 mg/kg的N-乙酰半胱氨酸，陰性對(duì)照組給予等量的生理鹽水。末次給藥后1小時(shí)，所有小鼠灌胃撲熱息痛1000 mg/kg，記錄72小時(shí)內(nèi)各組小鼠的

3、死亡數(shù)量并計(jì)算出藥物的保護(hù)率。 3．TPs對(duì)CYP2El和CYP1A2表達(dá)的影響：雄性小鼠分別按100 mg/kg·d-、200 mg/kg·d-和400 mg/kg·d-TPs灌胃給藥5天。陽性對(duì)照組和陰性對(duì)照組分別給予等量的生理鹽水。末次給藥后1小時(shí)，除生理鹽水組外，所有小鼠灌胃撲熱息痛500mg/kg，24小時(shí)后斷頭處死立即取肝，用冷的生理鹽水沖洗，把部分肝臟標(biāo)本放于10％福爾馬林固定和-80℃中凍存。用病理切片觀察肝臟病

4、變，用免疫組化、Western blot和RT-PCR方法檢測CYP2E1和CYP1A2表達(dá)情況。 結(jié)果： 與陰性對(duì)照組相比，TPs三個(gè)劑量組小鼠CYP450和b5含量明顯降低，差異顯著(P<0.01)，且有劑量依賴性；TPs能顯著降低撲熱息痛所致小鼠的死亡率和改善撲熱息痛所致肝損傷病理改變：與陰性對(duì)照組相比，TPs中劑量組和低劑量組能顯著降低CYP2E1蛋白和mRNA表達(dá)(P<0.01)，而TPs各劑量組能顯著降低CY

5、P1A2蛋白和mRNA表達(dá)(P<0.05)。 結(jié)論： 1．短期應(yīng)用TPs對(duì)CYP450和b5有抑制作用并呈劑量依賴性。 2．在撲熱息痛誘發(fā)的小鼠肝損傷模型中，TPs顯示了顯著的肝臟保護(hù)作用，表現(xiàn)為小鼠的死亡率明顯降低和肝臟病變明顯改善。 3．在撲熱息痛誘發(fā)的小鼠肝損傷模型中，TPs對(duì)CYP450同功酶CYP2E1和CYP1A2蛋白和mRNA表達(dá)有顯著抑制作用且有劑量依賴性，這一結(jié)果提示TPs通過抑制CYP