明目地黃丸知柏地黃丸和六味地黃丸指紋圖譜雙指標(biāo)等級(jí)序列模式識(shí)別研究.pdf

1、分析科學(xué)研究的一個(gè)重要領(lǐng)域是生物復(fù)雜體系。生物復(fù)雜體系一般含有幾十個(gè)至上萬個(gè)變量，如蛋白組學(xué)、基因組學(xué)、代謝組學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)及中藥復(fù)方研究體系。分析研究對(duì)象也可分為白色體系、灰色體系和黑色體系，生物復(fù)雜體系的整體分析一般屬于黑色體系，其研究具有極大的困難性。目前已有多種模式識(shí)別方法應(yīng)用于白色和灰色體系的研究，針對(duì)生物復(fù)雜的黑色體系的研究仍是難點(diǎn)。本研究論文針對(duì)中藥復(fù)方黑色體系進(jìn)行了鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究。 中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床治病的主

2、要形式和臨床防病治病的主要工具，也是中醫(yī)藥治療體系的精髓，具備了功效的多向性和適應(yīng)的廣泛性。中藥復(fù)方的準(zhǔn)確鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究是中醫(yī)藥現(xiàn)代研究的核心課題。中藥復(fù)方由數(shù)種到數(shù)十種藥材組成，含有幾十至成百上千種化學(xué)成分，是非常復(fù)雜的生物體系，對(duì)中藥復(fù)方的鑒別和質(zhì)量控制難度很大。目前雖有多種方法應(yīng)用于中藥復(fù)方的鑒別與質(zhì)量評(píng)價(jià)，但主要采用分析白色體系和灰色體系的方法，依賴于選擇對(duì)照樣本或標(biāo)準(zhǔn)樣本，或已知樣本的性質(zhì)，根據(jù)先驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)建立鑒別和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，

3、而中藥復(fù)方?jīng)]有明確的外觀差異，相當(dāng)于一個(gè)黑色體系，鑒別和準(zhǔn)確的質(zhì)量評(píng)價(jià)具有巨大的困難。依據(jù)外觀特征無法嚴(yán)格地確定中藥復(fù)方的內(nèi)在品質(zhì)，準(zhǔn)確選擇對(duì)照樣本或標(biāo)準(zhǔn)樣本，目前的方法無法對(duì)中藥復(fù)方進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)。本研究旨在方法學(xué)上建立一種適合于黑色體系，不依賴于主觀經(jīng)驗(yàn)的、對(duì)中藥復(fù)方復(fù)雜體系具有準(zhǔn)確精細(xì)鑒別能力的方法。本文以成分組成非常相近的中藥復(fù)方六味地黃丸、明目地黃丸和知柏地黃丸樣品為代表進(jìn)行了研究。 中藥地黃丸歷史悠久，療效

4、獨(dú)特，是中藥復(fù)方中的經(jīng)典名方，由六味地黃丸衍生出明目地黃丸和知柏地黃丸等多種藥效不同的地黃丸系列中藥復(fù)方藥品，對(duì)地黃丸系列藥品的質(zhì)量控制研究是一項(xiàng)極其復(fù)雜且具有重要意義的研究工作。 本研究在共有峰率和變異峰率雙指標(biāo)序列分析的基礎(chǔ)上建立了指紋圖譜雙指標(biāo)等級(jí)序列模式識(shí)別方法，該方法既具有雙指標(biāo)序列的精細(xì)分辨能力，又可對(duì)性質(zhì)極其相近的樣品進(jìn)行準(zhǔn)確的模式識(shí)別。通過計(jì)算序列的平均共有峰率P和平均變異峰率Pv，共有峰率的標(biāo)準(zhǔn)偏差S和變異峰率

5、的標(biāo)準(zhǔn)偏差Sv，采用正態(tài)分布法，確定不同質(zhì)量等級(jí)的共有峰率范圍P≥P+0．5*S，和變異峰率范圍Pv

6、性區(qū)間的溶劑提取三種地黃丸系列樣品，三種提取物代表著不同的成分區(qū)間，測試其原藥粉末和提取物的紅外指紋圖譜及其無水乙醇提取物的高效液相色譜指紋圖譜，采用雙指標(biāo)等級(jí)序列模式識(shí)別分析法分別從共有峰率和變異峰率兩個(gè)角度對(duì)這幾種地黃丸進(jìn)行了鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究。本論文共分為四大部分： 第一部分，在查閱大量中藥紅外指紋圖譜和高效液相色譜指紋圖譜指紋圖研究文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，著重對(duì)指紋圖譜分析方法進(jìn)行了綜述。 第二部分，分析了不同分析方法的特

7、點(diǎn)，為本研究論文提供研究思路。創(chuàng)建了雙指標(biāo)等級(jí)序列模式識(shí)別法。 第三部分，以組成相近的明目地黃丸、知柏地黃丸和六味地黃丸等地黃丸系列樣品為研究對(duì)象，概述了其組成和藥效。 第四部分，實(shí)驗(yàn)與結(jié)論。應(yīng)用共有峰率和變異峰率雙指標(biāo)等級(jí)序列模式識(shí)別分析法，對(duì)明目地黃丸、知柏地黃丸和六味地黃丸粉末及其溶劑（氯仿、乙醇和水）提取物的紅外指紋圖譜數(shù)據(jù)，從共有峰率和變異峰率兩個(gè)方面進(jìn)行深入研究，結(jié)果表明，不同廠家生產(chǎn)的同種地黃丸產(chǎn)品有一定的

8、差異，同一廠家生產(chǎn)的同種產(chǎn)品相似性更高。氯仿無水乙醇提取物和原藥粉末的紅外指紋圖譜共有峰率和變異峰率的分析結(jié)果，皆可以對(duì)三種地黃丸產(chǎn)品進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別和質(zhì)量控制，而水提物的分析結(jié)果較差。根據(jù)明目地黃丸和知柏地黃丸無水乙醇提取物的高效液相指紋圖譜，可以對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的模式識(shí)別。 本文在方法學(xué)上提出了雙指標(biāo)等級(jí)序列分析方法，首次對(duì)明目地黃丸、知柏地黃丸和六味地黃丸等中藥復(fù)方樣品進(jìn)行了鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該法對(duì)中藥復(fù)方具有準(zhǔn)確