巨噬細(xì)胞移動抑制因子對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和血管形成的影響.pdf

1、目的：近年來有研究表明MIF在許多腫瘤中都有較高的表達(dá)，并有可能參與腫瘤的血管生成、增殖和遷移。但其具體機(jī)制目前還未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察抗MIF抗體(Anti-MIF)對結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116增殖的影響并通過檢測VEGF在細(xì)胞的表達(dá)探討其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法：MTT比色分析法檢測Anti-MIF對HCT-116細(xì)胞的增殖影響，流式細(xì)胞儀檢測經(jīng)Anti-MIF處理后HCT-116細(xì)胞周期的變化。免疫組織化學(xué)方法

2、及蛋白印跡(western-blot)法檢測經(jīng)Anti-MIF處理后細(xì)胞中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)的表達(dá)。 結(jié)果：100、200、400、800μg/L Anti-MIF在不同時(shí)間段處理HCT-116細(xì)胞后，24h組其細(xì)胞抑制率分別為(1.02％，3.90％，8.62％，15.28％)，48h組抑制率(2.16％，6.83％，18.24％，38.20％)，72h組抑制率(5.09％，12.92％，33.91％，53.56

3、％)。細(xì)胞增殖明顯受到抑制，呈時(shí)間-劑量依賴性特點(diǎn)。尤以72h組最為顯著，分別跟Oμg/L，組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且組內(nèi)兩兩比較均具有顯著性差異(P＜0.01)；100、200、400、800μg/L，Anti-MIF處理HCT-116細(xì)胞72h后，流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期分析表明G0/G1期細(xì)胞百分率上升，S期和G2/M期細(xì)胞百分率下降。以800μg/L組最為顯著，G0/G1期、S期和G2/M期分別跟0μg/L組比較均有統(tǒng)計(jì)

4、學(xué)意義(P＜0.05)；Anti-MIF對細(xì)胞中VEGF的表達(dá)有明顯抑制作用，其表達(dá)隨著Anti-MIF劑量的增加而減少。Anti-MIF 100、200、400、800μg/L組作用72h后，VEGF蛋白表達(dá)分別為(20567.48±1522.19，7188.03±1011.59，13920.21±1305.72，13256。5±1266.09和11845.62±1071.20)，與0μg/L組比較，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。