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文檔簡介
1、目的：探討靶向細胞周期蛋白依賴激酶CDK2(cyclin-dependent-kinase2)及細胞周期蛋白E(CyclinE)的小分子干擾RNA(siRNA)對肝癌細胞株HepG2細胞周期和細胞凋亡的影響。 方法：根據(jù)GenBank中登錄的人和鼠CDK2、CyclinE序列，應(yīng)用siRNA設(shè)計軟件，設(shè)計并構(gòu)建CDK2、CyclinE干擾RNA真核表達載體；脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染肝癌細胞株HepG2細胞，流式細胞儀分析CDK2及Cycli
2、nE對HepG2細胞增殖的影響；Western blot法檢測CDK2、CyclinE活性的變化對Caspase-3活性的影響。 結(jié)果： 1.成功構(gòu)建CDK2及CyclinE干擾RNA真核表達載體psiCDK2、psiCyclinE，用脂質(zhì)體法導(dǎo)入肝癌細胞株HepG2細胞中，有效表達。 2.轉(zhuǎn)染48h后與空載體組相比：psiCDK2、psiCyclinE組G1期細胞增多，G2/M和S期細胞減少；Western b
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