PPARγ受體激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)慢阻肺大鼠花生四烯酸代謝產(chǎn)物的調(diào)節(jié).pdf

1、慢性阻塞性肺疾患(chronic obstructive pulmonary diseases，COPD，簡(jiǎn)稱慢阻肺)是一組以慢性氣流受限為特征的緩慢進(jìn)展、漸進(jìn)性加重的肺部疾病。氣道慢性炎癥在慢阻肺的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。過氧化物酶體增殖物激活的受體(peroxisome proliferators-activated receptorγ，PPARγ)是配體激活的核激素受體超家族轉(zhuǎn)錄因子，具有抗炎作用的15羥-二十碳四烯酸(15-h

2、ydroxyeico-satetranoic acid，15-HETE)和15-d-PGJ2是PPARγ的天然配體。本實(shí)驗(yàn)室的研究表明PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)熏煙和氣管內(nèi)滴注大腸桿菌脂多糖所復(fù)制的大鼠慢阻肺有防治作用，其機(jī)制與抑制趨化因子產(chǎn)生、抑制白細(xì)胞的激活有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步分析了羅格列酮對(duì)慢阻肺大鼠花生四烯酸脂氧酶代謝途徑和核因子-κB活化的調(diào)節(jié)作用。 本實(shí)驗(yàn)采用32只普通級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為4組，分別(1)正常對(duì)照組：不做

3、任何處理； (2)COPD組：采用熏煙和氣管內(nèi)滴注大腸桿菌脂多糖(Lipolysaccharide，LPS)的方法復(fù)制COPD模型；(3)羅格列酮治療組：每天熏煙前予以羅格列酮灌胃，0.02mg/只，其它處理同COPD組。(4)羅格列酮對(duì)照組：每天予以羅格列酮灌胃，0.02mg/只，其它處理同對(duì)照組。第29天處死所有大鼠留取右肺肺組織和收集左肺支氣管肺泡灌洗液。測(cè)定各組大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)中自細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類。用ELISA法測(cè)

4、定各組肺組織勻漿上清中15-脂氧酶的水平。用免疫熒光法測(cè)定NF-κB細(xì)胞核染色陽性細(xì)胞數(shù)百分比。用液相色譜法檢測(cè)各組花生四烯酸代謝產(chǎn)物白三烯的水平及15-羥基-二十碳四烯酸(15-HETE)的水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用means±s表示，SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理，組間差別比較用單因素方差分析(ANOVA)及直線相關(guān)分析。 結(jié)果如下： (1)各組BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)(×105/L)COPD組BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)(90.38±4.0

5、7)顯著高于其余三組(P<0.01)；羅格列酮治療組BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)(57.38±4.10)顯著高于對(duì)照組和羅格列酮對(duì)照組(P<0.01)而低于COPD組(P<0.01)；正常對(duì)照組BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)(8.00±2.00)與羅格列酮對(duì)照組(8.25±1.98)無差別(P>0.05)。 (2)ELISA法檢測(cè)各組肺組織勻漿上清中15-脂氧酶COPD組和羅格列酮治療組15-脂氧酶的含量高于對(duì)照組，但是無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.0

6、5)。 (3)液相色譜檢測(cè)肺組織中花生四烯酸代謝產(chǎn)物白三烯及15-HETE的水平 LTC，LTE，15-HETE這三種代謝產(chǎn)物雖然具有量上的變化，且變化趨勢(shì)不一，但無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 (4)免疫熒光法檢測(cè)NF-kB陽性細(xì)胞核細(xì)胞數(shù)百分比 COPD組NF-kB細(xì)胞核染色陽性細(xì)胞數(shù)百分比(37.38±5.10)顯著高于其余三組(P<0.01)：羅格列酮治療組NF-kB細(xì)胞核染色陽性細(xì)胞數(shù)百分比(24.00±

7、2.00)顯著高于正常對(duì)照組和羅格列酮對(duì)照組(P<0.01)而低于COPD組(P<0.01)；單打?qū)φ战MNF-kB細(xì)胞核染色陽性細(xì)胞數(shù)百分比(8.00±2.14)與羅格列酮對(duì)照組(7.38±1.41)無差別(P>0.05)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明羅格列酮能抑制熏煙和氣管內(nèi)滴注LPS所致的COPD炎癥反應(yīng)中炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，降低肺組織損傷。其作用機(jī)制可能是通過抑制NF-kB核轉(zhuǎn)錄因子從而抑制炎癥介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄生成進(jìn)而抑制炎性細(xì)胞激活所致的氣道炎