Celecoxib對(duì)SHG-44細(xì)胞的放射增敏效應(yīng)及對(duì)CyclinB1表達(dá)影響的初步研究.pdf

1、目的：評(píng)價(jià)Celeeoxib對(duì)SHG-44細(xì)胞的放射增敏效應(yīng)，觀察其聯(lián)合放射作用對(duì)細(xì)胞周期時(shí)相分布的影響，并初步探討Celecoxib調(diào)控細(xì)胞周期可能的信號(hào)通路機(jī)制。 方法：選擇膠質(zhì)瘤SHG-44細(xì)胞系，以不同Celecoxib濃度(0μM、30μM、50μM、100μM)設(shè)立藥物組(D組)，并以不同劑量6MV-X線照射(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)設(shè)立放射組(R組)，二者交互設(shè)立藥物+放射組(D+R組)，分別行四氮

2、唑鹽(MTT)比色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞抑制率，克隆形成實(shí)驗(yàn)繪制細(xì)胞存活曲線、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期時(shí)相分布及凋亡率，RT-PCR及Real Time-PCR檢測(cè)CyclinB1mRNA表達(dá)及水平。 結(jié)果： 1．MTT檢測(cè)結(jié)果提示不同濃度和不同作用時(shí)間的COX-2抑制劑Celecoxib對(duì)SHG-44的增殖抑制程度不同，隨藥物濃度增加、作用時(shí)間延長，抑制效應(yīng)相應(yīng)增強(qiáng)； 2．克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果及存活曲線相關(guān)參數(shù)顯示：Celeeoxib對(duì)SHG

3、-44細(xì)胞株有一定程度的放射增敏效應(yīng)，D+R組較R組相比，放射敏感性指標(biāo)SF2、D0.0l、D0、Dq均呈現(xiàn)不同程度的下調(diào)： 3．流式細(xì)胞周期分析顯示：細(xì)胞周期各時(shí)相分布在D組、R組及D+R組中均有差異。D組及D+R組中：50μmol/L均較0μmol/L和30μmol/L G2/M期阻滯增加(P＜0.01)，但30μmol/L較0μmol/L G2/M期阻滯無顯著增加(P=0.05)；R組：6Gy和8Gy時(shí)G2/M期阻滯較0Gy明顯增

4、加(P＜0.01)，但2Gy和4Cy較0Gy無明顯增加(P＞0.05)；D+R組50μmol/LCelecoxib時(shí)，各照射劑量下，與R組比較，G2/M期阻滯均進(jìn)一步增強(qiáng)(P<0.05)，但30μmol/L時(shí)各照射劑量下的G2/M期阻滯較R組均無明顯增加(P>0.05)。 4.RT—PCR證實(shí)各實(shí)驗(yàn)組SHG-44細(xì)胞均有CyclinB1表達(dá)，經(jīng)Real-TimePCR進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：D組30μmol/L、50μmol/L、100

5、μmol/L時(shí)CyclinB1表達(dá)均較空白對(duì)照(30μmol/L)有明顯降低(P<0.05)，但不同藥物濃度組間的CyelinB1表達(dá)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；D+R組僅在100μmol/L時(shí)CyclinB1表達(dá)較D組明顯下降，余濃度(0、30、50μmol/L)R+D組較D組無明顯下降(P>0.05)． 結(jié)論： 1.選擇性COX-2抑制劑Celecoxib在體外實(shí)驗(yàn)中可提高腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株SHG-44的放射敏感性