扶正增效方對(duì)非小細(xì)胞肺癌放射增敏的臨床及基因表達(dá)譜研究.pdf

1、[目的]扶正增效方是張代釗教授的經(jīng)驗(yàn)方，既往臨床及實(shí)驗(yàn)研究證明該方具有放射增敏作用。本論文在既往研究的基礎(chǔ)上，通過前瞻性臨床研究，進(jìn)一步觀察其配合非小細(xì)胞肺癌放療對(duì)近期療效和生活質(zhì)量的影響；實(shí)驗(yàn)通過基因芯片的方法，探討基因水平上該方放射增敏的作用機(jī)理和作用靶點(diǎn)。 [方法]臨床采用前瞻性、隨機(jī)、平行對(duì)照的設(shè)計(jì)，將62例非小細(xì)胞肺癌患者分為觀察組(扶正增效方配合放療組)32例和對(duì)照組(單純放療組)30例，觀察近期療效、不良反應(yīng)及生活

2、質(zhì)量情況。 實(shí)驗(yàn)研究建立PAa裸小鼠移植瘤模型，分為Ⅰ空白組、Ⅱ單純放療組、Ⅲ中藥組(放射加扶正增效方組)、Ⅳ西藥組(放射加甲硝唑組)。瘤體生長至平均直徑約1cm時(shí)給予瘤體單次β電子線照射(空白組不照射)。照射后23h快速取瘤體，提取組織總RNA，分離mRNA，逆轉(zhuǎn)錄，生物素標(biāo)記，采用AffymetrixHumanGenomeU1332.0Array基因芯片。掃描結(jié)果采用實(shí)時(shí)-PCR技術(shù)驗(yàn)證，以檢測基因芯片結(jié)果的可信度。

3、 [結(jié)果]臨床試驗(yàn)顯示治療后觀察組、對(duì)照組近期有效率(CR+PR)分別為68.75％、39.00％，觀察組療效優(yōu)于對(duì)照組，P＜0.05；觀察組白細(xì)胞下降情況、肺部癥狀、皮膚癥狀均優(yōu)于對(duì)照組，P＜0.05；卡氏評(píng)分情況觀察組明顯高于對(duì)照組，P＜0.001；EORTCQLQ-C30和QLQ-LC13評(píng)定生活質(zhì)量情況，兩組在總體健康、疲乏、呼吸困難方面差異有顯著性意義，咳嗽癥狀差異有極顯著性意義，中藥組優(yōu)于對(duì)照組。 實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：單純

4、放療組與空白對(duì)照組的基因表達(dá)譜顯示，差異基因共有46條，其中上調(diào)34條，下調(diào)12條，登錄GeneBank的有7條；差異基因主要與DNA損傷與修復(fù)、凋亡相關(guān)。中藥組與單純放療組相比，差異基因共有857條，上調(diào)349條，下調(diào)508條。其中39條在GeneBank中登錄，包括18條表達(dá)上調(diào)，21條表達(dá)下調(diào)；按照功能分為細(xì)胞周期、凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝等類。西藥組與單純放療組差異基因47條，其中上調(diào)37條，下調(diào)10條，15條登錄GeneBank。

5、主要與DNA損傷與修復(fù)、凋亡、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)。中藥組與西藥組的基因表達(dá)譜比較：上調(diào)335條，下調(diào)410條，21條登錄GeneBank，按功能分為DNA損傷與修復(fù)、凋亡、周期、信號(hào)傳導(dǎo)和免疫相關(guān)基因。實(shí)時(shí)-PCR驗(yàn)證結(jié)果與芯片掃描結(jié)果一致。 [結(jié)論]臨床研究結(jié)果顯示扶正增效方配合放療能夠提高非小細(xì)胞肺癌放療患者的近期有效率，與單純放療組相比，有顯著性差異。扶正增效方能減輕放療引起的毒副反應(yīng)，改善放療患者的癥狀，如白細(xì)胞下降、呼吸困難

6、、咳嗽、吞咽困難等，改善卡氏評(píng)分狀況，與單純放療組比較，有顯著性差異；EORTCQLQ-C30和QLQ-LC13問卷結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)該方能夠提高生活質(zhì)量。 基因芯片的結(jié)果顯示，扶正增效方可能通過抑制DNA修復(fù)，誘導(dǎo)凋亡，減少S期細(xì)胞，抑制原癌基因的表達(dá)，起到放射增敏的作用；與既往研究結(jié)果一致。采用實(shí)時(shí)-PCR方法驗(yàn)證，證實(shí)芯片結(jié)果有較高的可信度。在已知功能的基因中，扶正增效方放射增敏作用的具體靶點(diǎn)，與甲硝唑不同。芯片結(jié)果中大量未知