NF-κB信號(hào)通路在幽門(mén)螺桿菌致病機(jī)制中的作用的研究.pdf

1、目的： 通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究NF-κB信號(hào)通路在幽門(mén)螺桿菌引起慢性胃炎的機(jī)制中所起的作用，以及評(píng)價(jià)特異性調(diào)節(jié)NF-κB活性對(duì)于減輕幽門(mén)螺桿菌引起的慢性炎癥反應(yīng)的作用，為將來(lái)的動(dòng)物及臨床實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)，為阻斷慢性炎癥向胃癌發(fā)展這一進(jìn)程提供依據(jù)，從而為最終解決由幽門(mén)螺桿菌所引起的慢性胃炎等疾病提供有效的方案。 方法： 分別培養(yǎng)幽門(mén)螺桿菌11637標(biāo)準(zhǔn)菌株以及人胃粘膜上皮細(xì)胞(GES－1)，將GES-1細(xì)胞分為3組：空白組、

2、GES-1+Hp組及GES-1+Hp+NF-κ抑制劑組，每組各做10例，在后兩組中按細(xì)胞與細(xì)菌為1:50的量加入Hp11637菌株，共培養(yǎng)24小時(shí)后，提取上清液用ELISA法檢測(cè)IL-8、TNF-a的含量，裂解細(xì)胞，用Western Blot法檢測(cè)NF-κB的表達(dá)含量。以空白組為對(duì)照分別比較Hp及NF-κB抑制劑對(duì)于=NF-κB信號(hào)通路的影響作用。 結(jié)果： 1、成功培養(yǎng)Hp11637標(biāo)準(zhǔn)菌株及GES-1細(xì)胞。 2

3、、在GES-1細(xì)胞中加入Hp菌株后共培養(yǎng)24小時(shí)后提取上清液再次進(jìn)行Hp培養(yǎng)，Hp培養(yǎng)成功。 3、在GES-1細(xì)胞中按比例加入定量的Hp菌株，共培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)上清液中的IL-8、TNF-a含量，較空白組明顯升高(p<0.05)，裂解細(xì)胞后檢測(cè)裂解液中的NF-κB表達(dá)量較空白組升高(p<0.05)。 4、在GES-1細(xì)胞中加入定量的Hp菌株以及特異性NF-κB信號(hào)通路抑制劑，共培養(yǎng)24小時(shí)后檢測(cè)上清液中的IL-8、TN