Hedgehog和NF-κB信號通路在Mtb感染AECⅡ的炎癥反應中的調(diào)控機制.pdf

1、肺臟是機體進行氣體交換的器官，其直接受到經(jīng)氣道呼入的外源微生物的侵染。越來越多的證據(jù)表明，在肺臟組織中具有干細胞特性的肺泡二型上皮細胞(AECⅡ)在機體防御外源微生物，特別是結核分枝桿菌(Mtb)的侵染中具有重要的作用，其主要是通過分泌細胞因子和促炎細胞因子等參與肺臟組織的免疫調(diào)控和炎癥反應，與巨噬細胞等免疫細胞共同清除外源病原微生物。有證據(jù)表明，調(diào)控胚胎發(fā)育的Hedgehog信號通路在機體抵抗炎癥反應中也發(fā)揮重要的作用，并且這種調(diào)節(jié)作

2、用與NF-κB信號通路存在復雜的雙邊關系，這提示我們，Hedgehog和NF-κB信號通路可能在機體防御Mtb入侵肺臟的免疫應答過程中具有調(diào)控作用。
　　目的：
　　探討Mtb在感染AECⅡ(A549)細胞的免疫應答過程中Hedgehog與NF-κB信號通路及炎癥細胞因子的表達變化。
　　方法：
　　本試驗利用BCG和H37Rv分別感染AECⅡ細胞A549和過表達Shh/NF-κB的A549細胞，qPCR、Wes

3、tern blot和ELISA檢測Hedgehog信號通路和NF-κB信號通路相關因子和炎癥細胞因子的表達變化。
　　結果：
　　1.H37Rv和BCG感染A549細胞后， Hedgehog信號通路中Shh、Ptch和Glil與NF-κB信號通路中p-NF-κB的表達升高，同時，伴隨著炎癥細胞因子IL-8和TNF-α的表達升高。并且，BCG感染A549細胞引起信號分子Shh、Ptch、Glil和NF-κB的表達高于H37Rv

4、。
　　2.在A549細胞中過表達NF-κB時，促進了Shh、Glil和IL-6、IL-8的表達;用BCG感染NF-κB過表達的A549細胞時促進了Shh、Glil、p-NF-κB、IL-6、IL-8和TNF-α的表達;用H37Rv感染NF-κB過表達的A549細胞時，也促進了Shh、Glil和p-NF-κB和炎癥細胞因子IL-6和IL-8的表達，但表達量低于BCG感染組。
　　3.在A549細胞中過表達Shh時促進了Shh

5、、Glil和p-NF-κB，以及炎癥細胞因子IL-8和TNF-α的表達;當用BCG和H37Rv感染Shh過表達的A549細胞Shh、Glil和p-NF-κB的表達高于Shh過表達組和空白對照組;用BCG感染Shh過表達組，促進了IL-6和IL-8的表達;用H37Rv感染Shh過表達組，促進了IL-12A和TNF-α的表達。
　　結論：
　　1.H37Rv和BCG感染AECⅡ細胞都能激活Hedgehog信號通路和NF-κB信號

6、通路并促進細胞的炎癥反應，Hedgehog信號通路和NF-κB信號通路具有相互促進的關系，但是H37Rv感染對這兩個信號通路的活化弱于BCG的感染，而H37Rv感染AECⅡ細胞引起的炎癥細胞因子的表達高于BCG感染。
　　2.過表達Shh的AECⅡ細胞對炎癥反應的調(diào)控與結核分枝桿菌的毒力有關:BCG感染時抑制了炎癥細胞因子的表達，而H37Rv感染促進了炎癥細胞因子的表達。
　　3.過表達NF-κB的AECⅡ細胞，BCG和H3