Hedgehog和NF-κB信號通路在Mtb感染AECⅡ的炎癥反應(yīng)中的調(diào)控機(jī)制.pdf

1、肺臟是機(jī)體進(jìn)行氣體交換的器官，其直接受到經(jīng)氣道呼入的外源微生物的侵染。越來越多的證據(jù)表明，在肺臟組織中具有干細(xì)胞特性的肺泡二型上皮細(xì)胞(AECⅡ)在機(jī)體防御外源微生物，特別是結(jié)核分枝桿菌(Mtb)的侵染中具有重要的作用，其主要是通過分泌細(xì)胞因子和促炎細(xì)胞因子等參與肺臟組織的免疫調(diào)控和炎癥反應(yīng)，與巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞共同清除外源病原微生物。有證據(jù)表明，調(diào)控胚胎發(fā)育的Hedgehog信號通路在機(jī)體抵抗炎癥反應(yīng)中也發(fā)揮重要的作用，并且這種調(diào)節(jié)作

2、用與NF-κB信號通路存在復(fù)雜的雙邊關(guān)系，這提示我們，Hedgehog和NF-κB信號通路可能在機(jī)體防御Mtb入侵肺臟的免疫應(yīng)答過程中具有調(diào)控作用。
　　目的：
　　探討Mtb在感染AECⅡ(A549)細(xì)胞的免疫應(yīng)答過程中Hedgehog與NF-κB信號通路及炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)變化。
　　方法：
　　本試驗(yàn)利用BCG和H37Rv分別感染AECⅡ細(xì)胞A549和過表達(dá)Shh/NF-κB的A549細(xì)胞，qPCR、Wes

3、tern blot和ELISA檢測Hedgehog信號通路和NF-κB信號通路相關(guān)因子和炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.H37Rv和BCG感染A549細(xì)胞后， Hedgehog信號通路中Shh、Ptch和Glil與NF-κB信號通路中p-NF-κB的表達(dá)升高，同時，伴隨著炎癥細(xì)胞因子IL-8和TNF-α的表達(dá)升高。并且，BCG感染A549細(xì)胞引起信號分子Shh、Ptch、Glil和NF-κB的表達(dá)高于H37Rv

4、。
　　2.在A549細(xì)胞中過表達(dá)NF-κB時，促進(jìn)了Shh、Glil和IL-6、IL-8的表達(dá);用BCG感染NF-κB過表達(dá)的A549細(xì)胞時促進(jìn)了Shh、Glil、p-NF-κB、IL-6、IL-8和TNF-α的表達(dá);用H37Rv感染NF-κB過表達(dá)的A549細(xì)胞時，也促進(jìn)了Shh、Glil和p-NF-κB和炎癥細(xì)胞因子IL-6和IL-8的表達(dá)，但表達(dá)量低于BCG感染組。
　　3.在A549細(xì)胞中過表達(dá)Shh時促進(jìn)了Shh

5、、Glil和p-NF-κB，以及炎癥細(xì)胞因子IL-8和TNF-α的表達(dá);當(dāng)用BCG和H37Rv感染Shh過表達(dá)的A549細(xì)胞Shh、Glil和p-NF-κB的表達(dá)高于Shh過表達(dá)組和空白對照組;用BCG感染Shh過表達(dá)組，促進(jìn)了IL-6和IL-8的表達(dá);用H37Rv感染Shh過表達(dá)組，促進(jìn)了IL-12A和TNF-α的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.H37Rv和BCG感染AECⅡ細(xì)胞都能激活Hedgehog信號通路和NF-κB信號

6、通路并促進(jìn)細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，Hedgehog信號通路和NF-κB信號通路具有相互促進(jìn)的關(guān)系，但是H37Rv感染對這兩個信號通路的活化弱于BCG的感染，而H37Rv感染AECⅡ細(xì)胞引起的炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)高于BCG感染。
　　2.過表達(dá)Shh的AECⅡ細(xì)胞對炎癥反應(yīng)的調(diào)控與結(jié)核分枝桿菌的毒力有關(guān):BCG感染時抑制了炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)，而H37Rv感染促進(jìn)了炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)。
　　3.過表達(dá)NF-κB的AECⅡ細(xì)胞，BCG和H3