大黃素和大黃酸通過(guò)激活細(xì)胞PPARγ促進(jìn)葡萄糖攝取.pdf

1、目的：研究中藥提取單體成分大黃素(emodin)和大黃酸(rhein)對(duì)肝細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)的激動(dòng)作用和葡萄糖攝取作用的影響。 方法：1.C2-C12骨骼肌細(xì)胞和3T3-L1脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)成熟及培養(yǎng)，HepG2肝細(xì)胞培養(yǎng)；2．將大黃素和大黃酸與誘導(dǎo)成熟的可用于實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，Wes

2、tern雜交法測(cè)定PPARγ和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(elucose transpon protein,GLUT)的蛋白表達(dá)水平；3.測(cè)定大黃素和大黃酸作用后的三種細(xì)胞對(duì)2．脫氧-[<'3>H]-D-葡萄糖攝取率的影響。 結(jié)果：1．大黃素作用劑量和時(shí)間依賴(lài)性地刺激HepG2細(xì)胞PPARγ和GLUT-2蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在90μmol/L和作用24 h刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的3.1～3.8倍(P<0.01)；GLU

3、T-2蛋白水平在90μmol/L和作用16 h刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的2.5～4.3倍(P<0.01)；HepG2細(xì)胞的葡萄糖攝取率在90 μmol/L濃度的大黃素作用24 h后，約為對(duì)照組的5倍(P<0.01)。2．大黃酸劑量(20～180μmol/L)和作用時(shí)間(8～24 h)依賴(lài)性的刺激HepG2細(xì)胞PPARγ和GLUT-2蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在90μmol/L和作用16 h時(shí)刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的2.8

4、～3.3倍(P<0.01)；GLUT-2蛋白水平在90 μmol/L和作用24 h刺激作用最強(qiáng)，分別為對(duì)照組的1.6～4.7倍(P<0.01)；HepG2細(xì)胞的葡萄糖攝取率在180 μmol/L濃度的大黃酸作用24 h后分別為對(duì)照組的5.7～6.7倍(P<0.00。3．大黃素濃度(40～240 gmol/L)依賴(lài)性地刺激C2-C12骨骼肌細(xì)胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L 作用24

5、 h刺激作用最強(qiáng)，為對(duì)照組的2.5倍(250±29，t=8.829，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在80μmol/L、作用24 h刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的3.2～3.6倍(P<0.01)；C2-C12骨骼肌細(xì)胞的葡萄糖攝取率在80 μmol/L濃度的大黃素作用24 h后作用顯著，約為對(duì)照組的4.9倍[(453.33±47.10)vs(91.67±23.51)，t=11.900，P<0.01]。4．大黃酸濃度(80～240μmol

6、/L)依賴(lài)性地刺激C2-C12骨骼肌細(xì)胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L作用24 h刺激作用最強(qiáng)，為對(duì)照組的1.6倍(160±16，t=6.495，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在80 μmol/L和作24 h刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的1.7～2.2倍(P<0.01)；C2-C12骨骼肌細(xì)胞的葡萄糖攝取率在80 μmol/L濃度的大黃酸作用24 h后作用顯著，約為對(duì)照組的4.7

7、～5.7倍(P<0.01)。5．大黃素濃度(40～240μmol/L)依賴(lài)性地刺激3T3-L1細(xì)胞PPART和GLUT-4蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在240 μmol/L作用24 h刺激作用最強(qiáng)，為對(duì)照組的3.3倍(330±15,t=26.558，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在160 μmol/L、作用16h刺激作用最強(qiáng)，約為對(duì)照組的4.6～5.8倍(P<0.01)；3T3-L1細(xì)胞的葡萄糖攝取率在160 μmol

8、/L濃度的大黃素作用24 h后，作用顯著，約為對(duì)照組的12.4倍[(352.0±24.22)vs28.33，t=23.147，P<0.01]。6．大黃酸濃度(40～240 μmol/L)依賴(lài)性地刺激3T3-L1細(xì)胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表達(dá)水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L作24 h刺激作用最強(qiáng)，為對(duì)照組的2.8倍(280±14，t=22.269，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在160 μmol/L、作用