姜黃素通過激活PPARγ和抑制BACE1減少神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)β樣淀粉蛋白的產(chǎn)生.pdf

1、目的：本課題旨在研究姜黃素處理體外培養(yǎng)的神經(jīng)元后BACE1、PPARγ及Aβ40/42的變化，探討其抑制β樣淀粉蛋白作用的可能機制，為AD治療提供新的思路。 方法：通過LipofectaminTM2000將質(zhì)粒APPswe與BACE1-mychis瞬時共轉(zhuǎn)染入SH-SY5Y細(xì)胞。（1）用姜黃素分濃度組與時間組處理細(xì)胞，通過RT-PCR測定BACE1及PPARγ的mRNA水平。通過WesternBlotting檢測BACE1及PP

2、ARγ的蛋白表達。通過ELISA檢測γ-分泌酶的主要水解產(chǎn)物Ap40/42的水平變化。（2）PPARγ抑制劑GW9662預(yù)處理細(xì)胞阻斷PPARγ活化，WesternBlotting檢測PPARγ及BACE1在對照組（DMSO+姜黃素）和抑制組（GW9662+姜黃素）的蛋白表達。RT-PCR檢測PPARγ及BACE1在對照組和抑制組的mRNA水平。 結(jié)果：RT-PCR及WesternBlotting結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染細(xì)胞經(jīng)姜黃素處理后B

3、ACE1的mRNA及蛋白表達水平顯著減少，呈濃度和時間依賴性（P<0.05）；而經(jīng)姜黃素處理后PPARγ的mRNA及蛋白表達水平增加，也呈濃度和時間依賴性（P<0.05）。ELISA結(jié)果顯示Ap40/42的產(chǎn)生隨處理濃度及時間的增加顯著降低（P<0.05）。PPARγ抑制劑GW9662預(yù)處理細(xì)胞后，RT-PCR及WesternBlotting結(jié)果顯示抑制組BACE1的mRNA及蛋白表達水平較對照組增加（P<0.05）；而PPARγ的mR