PHLDA3通過激活GSK3β抑制體細胞重編程.pdf

1、胚胎干細胞(ESCs)取自囊胚的內(nèi)細胞團，它具有分化成為多種多能干細胞和終端分化的體細胞的潛能，并且具有自我更新的能力，因此一直受到研究人員的青睞。近年來，胚胎干細胞的研究取得了飛躍性的發(fā)展。隨著胚胎干細胞定向分化成各種終端細胞的技術(shù)日趨成熟，它在醫(yī)學和臨床上的應用前景也越來越明朗。同時，在基因組學、蛋白質(zhì)組學、生物信息學發(fā)展的影響下，胚胎干細胞保持其分化潛能的復雜調(diào)控網(wǎng)絡也日趨清晰地展現(xiàn)在人們眼前。然而，胚胎干細胞在臨床應用上面臨著來

2、源有限、倫理爭議等限制。
　　體細胞重編程技術(shù)可以得到與胚胎干細胞(ESCs)特性相似的誘導性多能性干細胞（iPS）。誘導性多能干細胞技術(shù)的出現(xiàn)彌補了胚胎干細胞在應用領(lǐng)域的不足。成體細胞的來源十分廣泛、取材方便，并且不具有倫理方面的困擾。這為今后干細胞在臨床上的大規(guī)模應用提供了可能性。同時，這項技術(shù)打破了人們對高等動物細胞的固有認識，人們第一次發(fā)現(xiàn)高等動物的體細胞也可以在一定條件下轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹只瘽撃艿募毎?，為后來的研究提供了啟發(fā)性

3、的思路。
　　體細胞重編程的效率往往較低，許多基因?qū)υ撨^程起到抑制作用，p53就是其中之一，但是其中的分子機制并不完全明朗。我們在研究中發(fā)現(xiàn)，p53的一個直接靶基因，PHLDA3，具有抑制體細胞重編程的功能。該基因在之前的研究中主要被視為一個抑癌基因，而我們發(fā)現(xiàn)它參與了iPS誘導過程。PHLDA3在iPS、R1、E14等干細胞當中含量相對于體細胞更低，并且該基因的表達在體細胞重編程的過程中逐漸下降，而在RA誘導胚胎干細胞分化和擬胚

4、體形成過程中表達上升，暗示它可能與體細胞重編程和干細胞的多能性有關(guān)。過表達PHLDA3會明顯降低iPS誘導效率，而它的敲低會使誘導效率提高。在體細胞重編程過程中，PHLDA3會抑制AKT的活性，從而激活AKT下游GSK3β的活性。而抑制GSK3β可以回復PHLDA3過表達所造成的體細胞重編程效率下降，說明PHLDA3通過激活GSK3β抑制體細胞重編程。此外，在體細胞重編程過程當中PHLDA3也受到p53的正調(diào)控，并且可以替代一部分p53