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文檔簡介
1、目的: 特應性皮炎(AD)是一種慢性炎癥性皮膚病,其發(fā)病機制復雜,本實驗通過研究AD的HLA-Ⅱ類基因多態(tài)性及變應原誘導的TCRVβ鏈多態(tài)性表達,探討其發(fā)病的分子免疫學機制。 方法: 1、采用皮內點刺法對40名AD患者進行了皮膚過敏原測定,找出常見的過敏原。 2、用序列特異性引物聚合酶鏈反應(PCR),對AD患者進行HLA-DRB等位基因分型,并計算了HLA-DRB基因分型的相對危險度,找出AD的易感基因
2、和抗性基因。 3、用放射變應原吸附實驗(RAST)檢測所有患者血清抗hl slgE、抗dl sIgE、抗d2 sIgE、抗mx2 slgE、抗fx5E slgE值,進行基因型和特異性抗原的相關性研究。 4、運用流式細胞儀檢測特異性變應原誘導的TCRVl3鏈的多態(tài)性表達。 結果: 1、過敏原檢測:過敏原陽性率前四名依次為塵螨(45%)、塵土(37.5%),混合吸入過敏原(30%),春季花粉Ⅱ(22.5%)。
3、 2、HLA-DRB等位基因分型檢測:AD組的HLA-DR<,3>的基因頻率高于對照組有統(tǒng)計學意義;HLA-DR<,6>的基因頻率低于對照組有統(tǒng)計學意義。AD組HLA-DR<,3>的RR值是6.33>4,說明HLA-DR<,3>與AD有較肯定的相關性。AD的HLA-DR<,6>的RR值為0.13<1,說明HLA-DR<,6>是AD患者的抗性基因,具有HLA-DR<,6>的個體較不易患AD。 3、40例患者中有HLA-DR
4、<,3>陽性表達的有16例,其中1例抗hlslgE陽性、3例抗dlslgE陽性、12例抗d2slgE陽性、1例抗mx2slgE陽性、4例抗fX5EsIgE陽性,HLA-DR<,3>陽性患者中抗d2slgE陽性率比HLA-DR<,3>陰性患者中抗d<,2>slgE陽性率高。 4、不論是AD組還是健康對照組外周血淋巴細胞經塵螨抗原刺激前后TCRVβ的表達量均無明顯差異無統(tǒng)計學意義。但是AD組TCRVβ18<'+>T細胞的表達量在塵螨
5、刺激后(2.19±2.04)較刺激前有明顯的增高(1.26±1.49),增長了1.5倍以上。其中一名患者TCRVβ18的基礎表達值為0.56%,塵螨抗原刺激后表達量上升到3.99%。而17CRVβ18<'+>T細胞單純受分裂素(PHA)刺激后表達量無明顯改變。 結論: 1、塵螨是AD患者最常見的過敏原,是導致AD加重的常見過敏因素。 2、AD組的HLA-DR<,3>的基因頻率高于對照組;而HLA-DR<,6>的基
6、因頻率低于對照組。HLA-DR<,3>是AD的易感基因, HLA-DR<,6>是AD的抗性基因。 3、AD組的易感基因HLA-DR<,3>與抗d<,2>slgE有相關性,提示了塵螨抗原很可能是被抗原呈遞細胞呈遞后,與HLA-DR<,3>形成特異性復合物,進一步刺激T細胞的分化,導致機體免疫失調。 4、經塵螨抗原刺激后AD組TCRVβ18<'+>T細胞表達量較刺激前增高,TCRVβ18<'+>T細胞可能在塵螨誘發(fā)AD中起一
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