內(nèi)涵體pH敏感的紫杉醇前藥膠束納米粒的設(shè)計(jì)及應(yīng)用.pdf

1、本論文主要研究了一種基于紫杉醇的內(nèi)涵體酸敏感聚合物前藥膠束納米粒用于紫杉醇的快速細(xì)胞內(nèi)釋放和強(qiáng)抗癌活性。該聚合物前藥的主干是水溶性二嵌段聚合物聚乙二醇-b-聚丙烯酸（PEG-PAA），紫杉醇通過酸敏感的縮醛鍵鍵合到其側(cè)鏈上形成兩親性聚合物前藥。紫杉醇的含量可高達(dá)21.6%，27.0%和42.8%（分別標(biāo)記為prodrug1，prodrug2和prodrug3）。該兩親性聚合物前藥能夠在水溶液中自組裝形成具有核-殼結(jié)構(gòu)的膠束納米粒（粒徑為

2、158.3-180.3 nm）。該納米粒能在血液循環(huán)中穩(wěn)定，并能有效避免藥物突釋。體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，該前藥納米粒具有明顯的pH響應(yīng)性：在pH5.0和6.0下、48小時(shí)以后，分別有86.9%和66.4%的紫杉醇從prodrug3納米粒中釋放出來(lái)；而在pH7.4下PTX的釋放卻得到有效抑制，48小時(shí)后僅有29%的釋放。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Prodrug3納米粒表現(xiàn)出對(duì)KB和HeLa癌細(xì)胞的強(qiáng)抑制作用，其半致死濃度（IC50）分別為0.1

3、8和1.6μg PTX equiv./mL，PTX的IC50分別為0.03和0.3μg/mL；尤其是該前藥納米粒對(duì)抗紫杉醇的人肺癌細(xì)胞（A549/PTXR）也表現(xiàn)了明顯的抗癌活性，而聚合物前體（乙烯基醚功能化的 PEG-PAA）在濃度達(dá)到1.0 mg/mL時(shí)仍然沒有毒性。
　　接著，我們以該紫杉醇前藥為平臺(tái)、分別研究了表面偶聯(lián)葉酸的、酸敏感聚合物前藥納米粒用于靶向癌癥治療，和物理包埋阿霉素用于腫瘤的聯(lián)合治療。靶向紫杉醇前藥納米粒（

4、185-191 nm）由prodrug3和偶聯(lián)葉酸的PEG-聚丙交酯（FA-PEG-PLA）兩種聚合物自組裝形成。MTT結(jié)果表明，靶向紫杉醇前藥納米粒對(duì)表面過度表達(dá)葉酸受體的KB細(xì)胞（-FA）的抗癌活性比非靶向納米粒要高12倍，活性和自由的PTX相近；而對(duì)陰性對(duì)照MCF-7細(xì)胞，二者均無(wú)明顯藥效。另外，我們研究了以該紫杉醇前藥納米粒為載體物理包埋阿霉素（載藥量為5.8 wt.%），兩種藥物的體外釋放都具有酸敏感性。共聚焦激光掃描顯微鏡（