載紫杉醇PH敏感聚合物膠束對人肺癌A549細(xì)胞的作用及作用機(jī)制.pdf

1、目的：探討紫杉醇載藥對人肺癌A549細(xì)胞的作用及其作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供一定的依據(jù)。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)采用人肺癌A549細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對象，選擇合適濃度的游離紫杉醇作為陽性對照藥物，探究紫杉醇載藥對肺癌A549細(xì)胞的增殖及其機(jī)制。MTT法研究紫杉醇載藥所用的空白材料對人肺癌A549細(xì)胞是否有毒；以不同濃度的游離紫杉醇及其載藥作用于人肺癌A549細(xì)胞，并設(shè)只有完全培養(yǎng)基的細(xì)胞為陰性對照，MTT法觀察各個濃度藥物對該種腫瘤細(xì)胞的抑制作

2、用，并篩選合適濃度的游離紫杉醇作為陽性對照；Hoechst33342/PI雙染法觀察細(xì)胞凋亡與壞死情況；應(yīng)用Western-blot技術(shù)檢測Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá)情況；應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測Bcl-2和Bax的基因表達(dá)情況；應(yīng)用試劑盒法檢測細(xì)胞上清液中LDH的含量，檢測細(xì)胞中SOD和MDA的含量。
　　結(jié)果：紫杉醇載藥所用空白材料對細(xì)胞無毒；紫杉醇載藥對細(xì)胞增殖有抑制作用，并呈濃度依賴性； Hoechst33342/PI雙

3、染結(jié)果顯示，藥物作用濃度越高，細(xì)胞壞死及凋亡程度越大；Westen-blot結(jié)果顯示，Bax的蛋白表達(dá)量與濃度成正比例關(guān)系，Bcl-2的蛋白表達(dá)量與濃度呈反比例關(guān)系；RT-PCR結(jié)果顯示，Bax的基因表達(dá)量與濃度成正比例關(guān)系，Bcl-2的基因表達(dá)量與濃度呈反比例關(guān)系；試劑盒法結(jié)果顯示，藥物濃度越大，上清液中LDH含量越高，細(xì)胞中MDA含量越高，細(xì)胞中SOD含量越低。
　　結(jié)論：紫杉醇載藥對人肺癌A549細(xì)胞有抑制作用，并且可將細(xì)胞