紫杉醇聚乳酸納米粒制備工藝研究.pdf

1、[目的]紫杉醇(paclitaxel，TAX)作為目前最好抗腫瘤藥物之一，在臨床上已得到廣泛應用，特別是對乳腺癌、卵巢癌的治療作用明顯。因其水溶性極差(溶解度小于0.004mg/m1)，為了增加其溶解性，便于臨床給藥，在紫杉醇注射劑中均加入了一種表面活性劑——聚氧乙基蓖麻油(CremophorEL)，而聚氧乙基蓖麻油可促進組胺釋放，常引起嚴重的過敏反應，目前臨床上應用紫杉醇造成的不良反應多數(shù)與聚氧乙基蓖麻油有關。而采用生物降解材料制備紫

2、杉醇的納米粒(NP)可望解決此問題，并且利用納米粒的靶向和緩控釋作用，可在一定程度上提高藥物療效，降低毒副反應。本文探討了采用生物相容性好、可生物降解的高分子材料——聚乳酸(PLA)作為納米載體制備紫杉醇聚乳酸納米粒(TAX-PLA-NP)的制各工藝，為TAX-PLA-NP的進一步研究奠定了基礎。 [方法]本文采用單因素和多因素實驗考察了利用乳化溶劑揮發(fā)法制備TAX-PLA-NP過程中各因素對載藥量(DL)和藥物利用率(RY)的

3、影響及其規(guī)律。建立了高效液相色譜法(HPLC)檢測藥物含量，并計算載藥量、藥物利用率及包封率(ER)。采用透射電子顯微鏡觀察了TAX-PLA-NP的形態(tài)，采用激光散射法測定了TAX-PLA-NP的粒徑大小及其分布。并對TAX-PLA-NP膠體溶液的質(zhì)量進行了初步考察。 [結果]所建立的測定TAX-PLA-NP膠體溶液中TAX濃度及游離TAX濃度的HPLC方法準確可靠，其方法平均回收率分別為100.91±1.90％(n=9)、10

4、0.42±3.78％(n=9)；日內(nèi)精密度≤5.43％，日間精密度≤4.07％，能滿足TAX-PLA-NP制備工藝研究中載藥量、藥物利用率、包封率等指標檢測的需要。 通過對12個因素進行單因素考察，發(fā)現(xiàn)卵磷脂(PPC)用量、聚乙烯醇(PVA)濃度、有機相體積、揮發(fā)溫度、揮發(fā)時間、超聲乳化強度對TAX-PLA-NP的載藥量和藥物利用率有很大的影響，其中PPC、PVA的應用對TAX-PLA-NP的制備至關重要，是必不可少的條件；有機

5、相體積的增大、揮發(fā)溫度升高、揮發(fā)時間延長均使TAX-PLA-NP的載藥量和藥物利用率大幅度降低，超聲乳化強度過高或過低均使TAX-PLA-NP的載藥量和藥物利用率降低。另外NaOH的用量、水相體積、PLA用量、TAX用量、超聲乳化時間等因素也對TAX-PLA-NP的載藥量和藥物利用率有一定的影響。而PLA分子量的大小對TAX-PLA-NP的載藥量和藥物利用率無明顯影響。 多因素實驗中，通過均勻設計實驗考察了NaOH(0.1M)加

6、入量(X1)、超聲強度(X2)、PPC用量(X3)、CH2CL2用量(X4)等因素對載藥量的影響及其影響規(guī)律，求得多元回歸方程：DL(％)=3.00+3.27X1-0.0166X2+0.0987X3-0.0451X4，優(yōu)化實驗結果與預測值誤差為-2.25％。 所制備的TAX-PLA-NP納米粒在電鏡下觀察成圓球型，形態(tài)規(guī)則完整，較均勻。約99％的納米粒子平均數(shù)目徑為24.8～38.4nm，超過100nm的粒子約占1％甚至更低，但

7、這1％左右的粒子卻占整個納米粒體積的40.7～77.8％左右，其平均體積徑為377.7～473.4nm。TAX-PLA-NP粒子表面帶負電荷，其Zata電位范圍為-111.1～-15.9mv，其中75.6％的Zata電位為-16.0±1.6mv，24.4％Zata電位為-87.7±12.7mv。TAX-PLA-NP膠體溶液物理穩(wěn)定性較差，放置一定時間即有納米粒子長大并聚集沉降。 [結論]通過單因素和多因素實驗，找到了影響TAX-

8、PLA-NP載藥量和藥物利用率的因素，基本揭示了其影響規(guī)律，所求得的多元回歸方程具有很好的預測能力，為TAX-PLA-NP的制備提供了較強的可控性。 所制備的TAX-PLA-NP載藥量、包封率、藥物利用率較高，粒子形態(tài)規(guī)則完整，粒徑較小，數(shù)量分布較均勻，但體積分布不均勻，膠體溶液穩(wěn)定性較差，提示TAX-PLA-NP膠體溶液不宜直接應用或長期保存。TAX-PLA-NP制備工藝能基本滿足進一步深入研究的需要，但仍需加強對粒徑分布的控